Микробиологическое исследование почвы

Основными этапами микробиологического исследования почвы являются отбор проб, их подготовка и определение количества микроорганизмов.

На опытном участке размером 100-200 м отбирают 7-10 проб, весом около 0,5 кг каждая. Пробы тщательно перемешивают в стерильном мешке. Из смешанных проб берут средний образец весом до 1 кг и помещают в стерильный пергаментный пакет, вложенный в пакет из ткани. Все это помещают в полиэтиленовый мешок и транспортируют в лабораторию. В лаборатории образец подготавливают к исследованию: удаляют посторонние предметы, корешки, сушат, готовят навеску (1 г) и суспензию в колбе со 100 мл стерильной водопроводной воды. Из суспензии готовят десятикратные разведения, для чего 1 мл суспензии переносят в ряд пробирок с 9 мл стерильной водопроводной воды или стерильного физиологического раствора. Из разных разведений проводят посев на плотные или жидкие питательные среды. Из каждого образца берут не менее трех повторных навесок, а каждое разведение высевают не менее чем на две чашки. Выращивание микроорганизмов проводят при разных температурах, чтобы выявить и мезофильные, и термофильные микроорганизмы. При необходимости используют различные питательные среды для выделения плесневых грибов или актиномицетов.

Пересчет для определения содержания микроорганизмов в 1 г почвы проводят по формуле: Х=АхВх 100,

где X - количество микроорганизмов (КОЕ) в 1 г почвы;

А - среднее количество микроорганизмов, выросших на чашках Петри;

В - кратность разведения;

100 - количество стерильной водопроводной воды (мл)в колбе для приготовления суспензии.

Почвы считаются чистыми, когда микробное число не превышает 1,0 - 1,5 млн. КОЕ в 1 г, умеренно загрязненными, когда КОЕ находится в интервале от 1,5 до 3,0 млн. в 1г, сильно загрязненными - при КОЕ от 3,0 - 5,0 млн. в 1 г и более.

Полный санитарно-бактериологический анализ почвы включает определение не только общего количества микроорганизмов, но также и бактерий группы кишечной палочки, анаэробных микроорганизмов (клостридиум перфрингенс), термофильных микроорганизмов, определяющих характер загрязнения (навоз, фекалии, сточные воды). При необходимости ставят биохимические тесты и проводят идентификацию микроорганизмов.

Существуют также методы прямого счета бактерий в суспензии (метод Виноградского - Шульгиной) и методы количественного учета бактерий в почве, так называемый метод стекол обрастания предложенный Н.Г. Холодным: стекла помещают в почву на различную глубину, где происходит их обрастание микроорганизмами. Стекла извлекают, фиксируют, окрашивают и микроскопируют.