Выделение ЧК из производственной среды и посев культуры на чашки Петри

1. Из производственной среды отбирают небольшое количество (50-100 мл) дрожжевой суспензии. И проводят 3-4 промывки дистиллированной водой.

2. Заранее готовят 5 пробирок со стерильной водой по 9 мл в каждой (рис. 4). Пробирки закрывают ватными пробками. Данные пробирки служат для 5 кратного разведения дрожжей.

Из отмытых дрожжей отбирают 1 мл суспензии и вносят в первую пробирку, закрывают пробкой, затем из полученной водно-дрожжевой суспензии отбирают 1 мл и переносят в следующую пробирку и так далее.

3. Из последней пробирки после разведения отбирают микробиологической петлей каплю вводно-дрожжевой суспензии и переносят в центр чашки Петри. Нанесенную каплю осторожно распределяют микробиологической петлей по всей поверхности среды в чашке, после чего этим же шпателем с остатками материала протирают поверхность среды последовательно во второй, затем в третьей, реже в четвертой чашке Петри. При этом крышка каждой чашки должна быть открытой лишь настолько, чтобы в щель мог пройти только шпатель или петля. По окончании распределения накопительной культуры шпатель помещают в дезинфицирующий раствор.

Чашки Петри готовят описанным ниже способом. Плотную питательную среду (сусло-агар) расплавляют на кипящей водяной бане, охлаждают до 48-50⁰С и разливают в чашки Петри. Для этого сосуд со средой берут в правую руку, держат в наклонном положении, вынимают ватную пробку. Обжигают горловину сосуда в пламени горелки и, приоткрыв большим и указательным пальцем левой руки крышку чашки, быстро выливают расплавленную среду (15-20мл), чтобы дно чашки было покрыто полностью. Крышку закрывают, чашки оставляют на горизонтальном столе до полного застывания среды

После посева чашки переворачивают вверх дном и помещают в термостат при температуре 28-30 градусов на 1-2 суток.

4. Пересев культуры из чашек Петри в пробирки со скошенным сусло-агаром

После прорастания отдельных колоний клетку так же микробиологической петлей в стерильных условиях пересевают в пробирки со скошенным сусло-агаром.

Полученные пробирки каждый студент подписывает своей фамилией и помещают в термостат на 1-2 суток для проращивания. Полученную чистую культуру хранят в холодильнике не более 3 месяцев.