Разведение чистой культуры дрожжей в лаборатории. Основные стадии

Dr обычно выращивают в 4 стадии. Первые три выращивают на солодовом сусле или витаминизированной среде. Четвертая стадия на комбинированном сусле. Стерилизацию проводят в автоклаве под давлением 0,5 атм в течение 20 секунд.

Первая стадия.

В четыре пробирки наливают стерильную среду и производят засев из музейной культуры с соблюдением стерильности. Выращивают dr в термостате при 26-30 С в течение 18-24 часов.

Вторая стадия

В 4 колбы на 100 мл наливают по 50 мл сусла в каждую засевают 5 мл дрожжевой суспензии из первой стадии. Выращивают dr в термостате при 26-30 С в течение 18-24 часов. Dr являются засевными для третьей стадии.

Третья стадия.

В 4 пастеровские колбы на 750 мл наливают 450 мл сусла и с соблюдением стерильности вносят dr с предыдущей стадии. Выращивают dr в термостате при 26-30 С в течение 18-24 часов

В пастеровской колбе горлышко переходит в дважды изогнутую, открытую на конце трубку, через которую поступает воздух. Для предупреждения инфицирования конец трубки закрывают ватой. Кроме того, проникнуть микроорганизмам в питательную среду мешают изгибы трубки. Стеклянная надставка (справа) служит для стока жидкости. В настоящее время пользуются пластиковыми колбами, устроенными по тому же принципу.

Склянки со стерилизованной средой проверяют на стерильность, для чего их в течение 24 часов выдерживают в термостате при 35 ºС. Если за это время сусло в склянках не помутнеет, то его можно употреблять для приготовления ЧК.

Четвертая стадия.

В 4 колбы карлсберга на 10 литров заливают стерильное комбинирвоанное сусло (солодовое сусло + меласса). Вносят dr с третьей стадии. Выращивают dr в термостате при 26-30 С в течение 18-24 часов. Полученные dr являются засевными для цеха чистых культур.

Карлсбергская колба представляет собой медный, луженый внутри сосуд с двумя отводными трубками общей ёмкостью 3…8 л (рисунок 9). Верхняя трубка предназначена для наполнения колбы, нижняя – для выливания суспензии дрожжей. Изогнутая трубка справа служит для той же цели, что и в пастеровской
колбе.

После употребления колбу сначала тщательно ополаскивают холодной водой, затем наливают в неё 5 л водопроводной воды, ставят в автоклав и стерилизуют под давлением 1 атм в течение 1 часа. Перед употреблением воду выливают, заменяют её на 5 л заранее подготовленного в литровых бутылях сусла. Затем сусло в карлсбергской колбе кипятят 1 час, причём в
течение 30 секунд выпускают через одно отверстие, 30 секунд – через другое отверстие, затем последовательно закрывают ватными стерильными фильтрами. После кипячения колбу охлаждают до 30 ºС и сразу засевают.