Приготовление препаратов живых клеток

В зависимости от объекта и цели исследования живые клетки микроорганизмов наблюдают на препаратах «раздавленная капля» или «висячая капля».

Препарат «раздавленная капля» готовится с соблюдением правил асептики, о которых говорилось выше. Для этого на обезжи­ренное предметное стекло бактериологической петлей или оттянутой пипеткой наносят каплю стерильного физиологического раствора или стерильной водопроводной воды. Затем в эту каплю вносят небольшое количество микроорганизмов и накрывают покровным стеклом, не допуская образования пузырьков воздуха. Остатки воды удаляют фильтровальной бумагой, которую помещают в дезраствор. Не рекомендуется вносить в препарат большое количество бактериальной культуры, так как мазок будет густым и мало пригодным для наблюдения.

Препарат «раздавленная капля» микроскопируют с сухой системой, которая позволяет рассмотреть форму микроорганизмов, наличие или отсутствие подвижности. Для предупреждения быстрого высыхания препарата покровное стекло по периметру промазывают лаком для ногтей или вазелином.

В случае использования темнополевого конденсора препарат «раздавленная капля» готовят на предметном стекле, толщиной не более 1,0 - 1,1 мм, чтобы фокус конденсора не оказался в толще стекла. Между конденсором и предметным стеклом помещают каплю дистиллированной воды, которая имеет показатель преломления, близкий к показателю преломления стекла.

Для приготовления препарата «висячая капля» используют обезжиренное предметное стекло с лункой (рис. 34).

Рис. 34. Приготовление препарата «висячая капля»

1 –стекло с лункой; 2 – вазелин; 3 – покровное стекло с каплей исследуемого материала;

4 – наложение стекла лункой вниз на покровное стекло; 5 – готовый препарат «висячая капля»

На стеклянный мостик, лежащий на стеклянной кювете, помещают рядом предметное стекло с лункой (лункой вверх) и простое предметное стекло. По периметру в 1-2 мм от лунки наносят тонкие полоски вазелина. На предметное стекло без лунки помещают покровное стекло. В центр покровного стекла помещают каплю стерильного физиологического раствора и небольшое количество культуры микроорганизмов или же небольшое количество микробной суспензии. Затем предметное стекло с лункой переворачивают лункой вниз и накладывают на покровное стекло таким образом, чтобы капля была в центре. После прилипания покровного стекла предметное стекло переворачивают лункой вверх. При этом капля должна свободно висеть в образовавшейся камере и не растекаться. Такой препарат можно рассматривать с иммерсионной системой, наблюдать форму, спорообразование, движение и деление микроорганизмов.