Биологическая характеристика коринобактерий дифтерии

Возбудитель дифтерии — Corinobacterium diphtheriae (палочка Леффлера относится к роду Коринобактерий и представлена тремя биоварами gravis, mitis, intermedius.

К роду Коринобактерий относятся также сапрофиты, обитающие на слизистой нослоглотки — ложнодифтерийные палочки и дифтероиды.

Морфология: Гр+ тонкие палочки с утолщениями на концах в форме гантель. В утолщениях содержатся зерна волютина, выявляемые в окраске по Нейссеру. Неподвижны, спор и капсул не образуют. Окраска по Леффлеру — щелочным метиленовым синим (синька Леффлера) — зерна волютина окрашиваются более интенсивно. В мазке дифтерийные палочки располагаются попарно под углом к друг другу.

Сапрофитные коринобактерии располагаются частоколом, зерна волютина отсутствуют или располагаются на одном конце.

Тип дыхания — факультативные анаэробы.

Факторы патогенности — экзотоксин, ферменты патогенности.

Культуральные свойства. Растут только на средах содержащих кровь или сыворотку при температуре 37 градусов Цельсия.

Среда Ру-Леффлера — скошенная в пробирках лошадиная сыворотка с 25% бульоном и 1% глюкозой (желтая) используется для выделения ЧК. Рост через 14-18 часов в виде несливающихся колоний кремового цвета (вид шагреневой кожи).

Среда Клауберга — содержит кровь и теллурит калия (красная). Служит для первичного посева и одновременно является ДДС для биоваров дифтерийной палочки. Гравис-колонии в R-форме, крупные серо-черные с изрезанными краями. Митис-колонии в S-форме, среднего размера, черные, гладкие. Интермедиус — в S-форме, мелкие черные, гладкие (встречаются редко).

Среда Бучина — хинозольная среда синего цвета служит для первичного посева и позволяет отличить дифтерийную палочку от сапрофитных коринобактерий. Дифтерийная палочка — колонии синие. Ложнодифтерийные палочки — колонии голубые. Дифтероиды — колонии бесцветные.

Биохимические свойства. Дифтерийная палочка (все три биовара) расщепляют цистин до образования сероводорода и не расщепляю мочевину в отличии от сапрофитных коринобактерий.

По отношению к углеводам дифтерийная палочка расщепляет глюкозу и мальтозу до кислоты и не расщепляет сахарозу, лактозу, манит. Гравис в отличии от других биоваров расщепляет крахмал.

Антигенные свойства. К-аг — поверхностный белковый термонеустойчивый АГ. О-аг — соматический липополисахаридный типоспецифический АГ.

Питательные среды для коринобактерий дифтерии:

1. Среда Клауберга. Готовят в стерильных условиях из крови барана, глицерина, МПА, теллурита калия (красная).

2. Среда Бучина. К готовой хинозольной среде добавляют дефибринированную кровь (синяя).

3. Среда Пизу — МПА + раствор цистина + ацетат свинца + дефибринированная кровь. Разливают в пробирки столбиком (желтая). Посев уколом. Для определения цистиназы.

4. Среда Закса — раствор мочевины + феноловый красный + фосфаты натрия. Разлить в пробирки по 0,1 мл и стерилизовать текучим паром. Желтая. Для определения уреазы.