Фтизитатрия и пульмонология

Вопросы своевременной диагностики туберкулеза стали очень актуальны в последние годы в связи с ростом заболеваемости. Безусловно, «золотым стандартом ПЦР-Диагностику туберкулеза применяют в качестве подтверждающего метода выявления туберкулеза, особенно при внелегочной локализации очагов пораже­ния. Имеется значительный выбор коммерческих тест-систем для выявления ДНК Mycobacterium tuberculosis, Mycobacterium bovisи комплексной диагностики этих видов. Использование ПЦР с детекцией результатов в реальном времени позво­ляет проводить высокочувствительное исследование, как в специализированном, так и в общелечебном учреждении уже на первичном этапе. Возможность количественной оценки позволяет своевременно делать заключение о степени эпидемической опасности пациента. Кроме того, исследование парных образцов или сравнение материала до и после начала курса лечения дает возмож­ность контролировать эффективность противотуберкулезной терапии.

В последние годы появились методы генной диагностики штаммов микобактерий, резистентных к противотуберкулезным препаратам. В частности, устойчивость палочки Коха к изониазиду или рифампицину связана с мутациями микробных генов. Для выявления «генов резистентности» необходимо вырастить чистую куль­туру туберкулезных бактерий от данного больного. Из бактерий выделяют ДНК и подвергают амплификации (в варианте мультиплексной ПЦР) с целью получить сегменты генов, которые могут содержать эти мутации. Затем эти продукты ПЦР дополнительно подвергают гибридизации на носителях (биочипах) с набором ДНК-зондов, специфичных к искомым мутациям. Положительный результат гибридиза­ции свидетельствует о наличии мутации, вызывающей устойчивость к определенно­му препарату, в связи с чем больному следует назначить другой препарат.

Выявление патогенных бактерий в мокроте, бронхоальвеолярном лаваже и других биологических материалах при неспецифических бронхолегочных забо­леваниях (бронхитах, пневмониях) обычно проводят стандартными бактериоло­гическими и иммунологическими методами. Однако при подозрении на вирусные инфекции можно и нужно проводить ПЦР-диагностику (например, на вирусы гриппа, парагриппа, респираторно-синцитиального вируса и др.). Особое значение имеет своевременная диагностика патогенных грибов, в частности рода Aspergillus, Candida, Mucor и др., у маленьких детей, пациентов пожилого возраста и больных с подавленным иммунитетом (например, после интенсивной цитостатической терапии при онкологических заболеваниях). Здесь методы ПЦР ДНК по скорости выполнения, точности и специфичности диагностики существенно превосходят обычные способы исследования, применяемые в микологии (микроскопию, куль­тивирование, определение специфических галактоманнанов в плазме крови и т.д.).