Желудочном соке с последующей микроскопией осадка

Индивидуальный метод. Метод основан на переваривании в специальной жидкости образцов мышечной ткани, взятых из ножек диафрагмы и обнаружении в осадке (переваренной массе) личинок трихинелл.

Навеску (массу навески определяют согласно данным, приведенных в таблице 1) измельчают в мясорубке с диаметром решетки 3 - 4 мм, а затем переносят в коническую колбу соответствующей вместимости и заливают искусственным желудочным соком в соотношении 1:15. Колбу помещают в термостат при температуре 41 - 42°С и выдерживают 5 - 7 часов, периодически перемешивая. За 10 минут до окончания переваривания перемешивание прекращают. После окончания переваривания в осадке остаются хлопья коричневого или темно-коричневого цвета.

Из колбы осторожно сливают 2/3 надосадочной жидкости, осадок выливают на капроновое сито (полусферической формы с диаметром ячеек 400 мкм), установленное в стеклянной воронке диаметром 90 - 120 мм, соединенной резиновой трубкой с пробиркой вместимостью 5 см³.

Залитый осадок отстаивают 15-20 минут, а затем резиновую трубку перекрывают зажимом и пробирку отсоединяют. Содержимое пробирки (осадок) переносят по частям на часовое стекло и исследуют под малым (8х10) увеличением микроскопа или трихинеллоскопа на наличие личинок трихинелл. Если конкременты образовались в результате обызвествления личинок трихинелл, то последних обнаруживают в осадке в виде белых червячков. При наличии в мясе обызвествленных саркоцист в осадке находят споры.

Групповой метод. Метод группового исследования свинины на трихинеллез основан на растворении в переваривающей жидкости образцов мышечной ткани и обнаружении в осадке личинок трихинелл.

Растворение проб мышечной ткани осуществляют при помощи аппаратов для выделения личинок трихинелл АВТ или АВТ-У, которые представляют собой термостатирующую камеру с вмонтированными в нее тремя (аппарат АВЕ-У) или восьмью (аппарат АВТ) реакторами, предназначенными для растворения мышечной ткани в переваривающей жидкости. Реакторы имеют мешалку с индивидуальным привесом от электродвигателя и отстойник для сбора осадка.

Для трихинеллоскопии из ножек диафрагмы каждой свиной туши (на границе перехода мышечной ткани в сухожилие) отбирают пробу мышц массой 1 г по 0,5 г от каждой из ножек диафрагмы. В групповую пробу массой до 100 г входит до 100 проб, взятых от свиных туш. В зависимости от эпидемиолого-эпизоотической зоны, величина пробы для переваривания может быть увеличена с 1 до 4 г (таблица 5).

Групповую пробу измельчают на мясорубке с механическим или электрическим приводами Полученный фарш помещают в стакан, маркированный цифрой, соответствующей номеру реактора.

Термостатирующую камеру через патрубок в нижней части стойки аппарата соединяют с сетью горячего водоснабжения и заполняют теплой (40-42 ⁰С) водой до ее вытекания через патрубок в днище камеры. После этого аппарат подключают к электросети.

Для получениям переваривающей жидкости в каждый из реакторов заливают до метки теплую воду (40-42⁰ С), а затем вносят 5 г пищевого пепсина активностью 100000 ЕД и 25 мл концентрированной соляной кислоты. Для перемешивания смеси включают мешалку на 1 мин.

В реактор с переваривающей жидкостью через заправочный бункер вносят измельченную групповую пробу, включают двигатель мешалки и заводят таймер поворотом рукоятки вправо до отметки 20 минут. Окончание переваривания пробы определяют по звуковому сигналу таймера, после чего отключают двигатель и вновь заводят таймер до отметки 10 минут - времени, необходимого для отстаивания жидкости.

После звукового сигнала таймера осторожно открывают зажим отстойника и лунку кювета (емкостью 2 мл) заполняют осадком, образовавшимся на дне отстойника. Кювет маркирован цифрой, соответствующей номеру реактора. Затем закрывают зажим отстойника и осадок, собранный в кювете, подвергают исследованию на наличие личинок трихинелл.

Исследование осадка производят при помощи проекционного трихинеллоскопа, бинокулярной лупы или микроскопа.

При выявлении в осадке хотя бы одной личинки трихинелл соответствующую исследованную группу свиных туш переводят на запасной подвесной путь, разделяют на подгруппы по 10-12 туш и каждую из них подвергают индивидуальной трихинеллоскопии.

Туши из подгруппы, давшей положительный результат при повторной трихинеллоскопии, исследуют индивидуально компрессорным методом для выявления туши, пораженной личинками трихинелл.

С трихинеллезными тушами поступают в соответствии с действующими «Правилами ветеринарного осмотра убойных животных и ветеринарно-санитарной экспертизы мяса и мясных продуктов».

Однократно использованную переваривающую жидкость применяют для исследования еще двух групповых проб свинины, если результаты исследований первой, а затем второй групповой пробы были отрицательными. При положительном результате исследования повторное использование переваривающей жидкости не допускается. Отработанную переваривающую жидкость сливают в ванну, а затем в канализацию.

Результаты трихинеллоскопии свиных туш групповым методом регистрируют в журнале установленной формы.