Прямые методы обнаружения бледных спирохет

Бледные спирохеты обнаруживаются при микроскопическом исследовании тканевой жидкости из сифилитических элементов, а также пунктата лимфатических узлов. Ввиду опасности заражения при работе с этим материалом исследования проводят обязательно в резиновых перчатках, имея наготове для неотложной дезинфекции раствор сулемы 1:1000 или 1% раствор фенола.

Для получения тканевой жидкости очаг поражения, подозрительный на сифилис (первичные, вторичные сифилиды) предварительно тщательно очищают стерильным тампоном. Петлей производят осторожные (чтобы не вызвать кровотечение) поглаживающие движения по поверхности эрозии или язвы. Вскоре поверхность эрозии становится блестящей в результате просачивания тканевой жидкости.

На предметное стекло наносят 1 каплю изотонического раствора хлорида натрия, прибавляют к ней каплю тканевой жидкости, накрывают покровным стеклом и исследуют в темном поле зрения со специальным параболоид-конденсором. В темном поле зрения бледные спирохеты имеют вид подвижных серебристых спиралей или пунктира.

В тех случаях, когда необходимо изучить морфологию спирохет, проводится их окрашивание. Используют 2 группы методов:

- негативные – когда окрашивается фон, а спирохеты остаются бесцветными (метод Бури);

- позитивные, при которых окрашиваются сами спирохеты (метод Романовского).

Окраска бледных спирохет по Бури

На край предметного стекла наносят 1-2 капли черной туши и такое же количество тканевой жидкости из очага поражения. Капли осторожно смешивают и готовят мазок. Мазок высушивают и микроскопируют с иммерсией. На темно-сером фоне препарата хорошо видны неокрашенные бледные спирохеты.

Окраска бледных спирохет по Романовскому

На предметное стекло наносят 1 каплю исследуемой жидкости из сифилитических элементов и делают из неё мазок. Подсушивают его 1-1,5 часа, фиксируют и окрашивают краской Романовского в течение 14-15 часов, так как бледная спирохета плохо воспринимает анилиновые красители. Промывают водой, высушивают и микроскопируют с иммерсией. Бледная спирохета окрашивается в розовый цвет в отличие от сапрофитных форм спирохет, которые приобретают синий цвет.

Таблица 21

Дифференциация бледных спирохет и спирохет-сапрофитов

Признаки	Бледные спирохеты	Сапрофитные формы спирохет
Окраска по Романовскому	Розовый цвет	Синий цвет
Движения	4 вида движений: сгибательные, вращательные, поступательные, волнообразные	Беспорядочные
Количество витков	Более 6, обычно 8-14	Менее 6