Алгоритм микробиологической диагностики лептоспироза

Материал — кровь больного (5-7 день заболевания) — обнаружение лептоспиров в крови больного.

1. Микроскопия препарата крови - к 1 мл крови добавляют 1 мл цитрата натрия, наносят на предметное стекло. Покрывают покровным стеклом и микроскопируют в темном поле — наличие спиралевидных подвижных нитей с концами в виде крючков.

2. Бактериологический метод — выделение лептоспир из крови, мочи, ликвора. Исследуемый материал у постели больного засевают в 3-5 пробирок с жидкой питательной средой (кроличья сыворотка), заливают стерильным вазелиновым маслом и термостатируют при 28 градусах Цельсия в течении 2 месяцев. Рост контролируют через каждые 5-6 дней, т. к. при росте лептоспир среда остается прозрачной, из среды готовят препараты для микроскопии в темном поле.

3. Биопроба — заражение исследуемым материалом морских свинок (внутрибрюшинно) — через месяц забивают, из органов готовят препараты для микроскопии в темном поле, выделяют ЧК.

4. Серодиагностика — выявление соответствующих антител в крови больного с конца 1 недели. Ставится реакция агглютинации-лизиса (РАЛ). Сыворотку больного разводят от 1:100 до 1:1600 и в каждую пробирку вносят диагностикум — живые лептоспиры.

Учет через 24 часа путем приготовления из каждой пробирки препаратов «раздавленная капля» и их микроскопии в темном поле. При положительном результате в результате образования комплекса АГ+АТ происходит агглютинация лептоспир и их лизис.

При этом в первых пробирках наблюдается полный лизис, частичный лизис, в последующих — агглютинация лептоспир, видимая в микроскоп в виде склеенных лептоспир - «паучков».

Диагностический титр 1:100.

Разгар заболевания — титр 1:800 и выше.