Экспресс-диагностика гриппа

Исследуемый материал — мазки и смывы с носоглотки.

Риноцитоскопия: ориентировочный метод, позволяющих отличить вирус гриппа от других ОРВИ, но не позволяющих выявить типы вируса. С помощью узких стекол или пластинок из плексигласа берут мазки-отпечатки с поверхности нижней носовой раковины. Препараты окрашивают смесью фуксина и метиленовой сини. При наличии вируса гриппа в цитоплазме клеток цилиндрического эпителия слизистой обнаруживают характерные включения красного цвета.

РИФ:из смывов из носоглотки готовят мазки и обрабатывают противогрипозными люминисцирующими сыворотками. При люминисцентной микроскопии при наличии вируса гриппа наблюдаются светящиеся вирусные скопления располагающихся внутри эпителиальных клеток — в цитоплазме эпителия.

Вирусологическое исследование: смывы из носоглотки обрабатывают антибиотиками (для подавления бактерий), центрифугируют, собирают надосадочную жидкость, в которой содержится вирус. Этой жидкостью заражают куриный эмбрион. Наличие вируса определяют с помощью РГА (по способности вируса агглютинировать эритроциты). К амниотической жидкости, содержащей вирус (забирают шприцем через скорлупу) добавляют 3% взвесь отмытых эритроцитов курицы. При наличии вируса гриппа отмечается агглютинация эритроцитов (зонтик). При отсутствии вируса — пуговка.

При положительной РГА для определения типа вируса ставят РТГА с типоспецифичными вируснейтрализующими А, В, С сыворотками. При наличии вируса типа А в лунках с соответствующей сывороткой — пуговка (т. к. вирус гриппа А нейтрализовался сывороткой типа А и гемагглютинации нет). В лунках с сыворотками В и С — зонтик, т. к. вирусы не нейтрализованы. РТГА ставят в лунках, все компоненты (вируснейтрализующая сыворотка 1:10 и выше; материал, содержащий вирусы) по 0,25 мл.

Для реакции нейтрализации вируса в термостат при 37 градусах Цельсия на 1 час. Для выявления нейтрализации вируса (по отсутствию гемагглютинации) в лунки добавляют 3% взвесь эритроцитов. При положительной РТГА — пуговка, при отрицательной — зонтик. При обнаружении вируса типа А ставят РТГА с монорецептурными Н-сыворотками Н1-Н12 и реакцию преципитации в геле с монорецепторными N-сыворотками (1-10). Окончательный ответ: А(Москва), N25, 99г. Н7N3.