Використання органел

Це хлоропласти і мітохондрії. Одержання човникових векторів.

Вектори є спеціалізованими, служать для збільшення експресії клонованих генів. Вони містять ефективні промотори і ділянки ініціації й транскрипції.

Напрямок вдосконалення векторів:

1) зменшення розмірів векторів і обмеження ori тільки необхідними елементами;

2) збільшення числа специфічних ділянок для багатьох рестриктаз;

3) підвищення кількості селективних маркерів, щоб створити певну свободу клонування.

4) ослаблений контроль реплікації - одержання багатокомпонентних плазмід.

37. Основні методи введення генетичної інформації в рослинну клітину.

Принципова схема переносу генетичного матеріалу в рослинах:

Гени можуть бути отримані:

• хімічним синтезом;
• вирізанням з геному;

· зворотньою транскрипцією

Для трансформації рослинних клітин використовують 6 підходів.

1. Трансформація рослинних протопластів.

2. Метод кокультивування.

3. Метод мікроін’єкції ДНК.

4. Метод електропорації.

5. Метод упаковки в лізосоми.

6. Метод бамбордування мікрочастками.

Це всі методи прямого переносу векторів у рослин.

Основною перешкодою є клітинна стінка, що має досить тверду стуктуру.

38. Клонотеки: визначення, призначення, типи. Методи знаходження необхідного гену.

Бібліотека генів (клонотека) - це колекція фрагментів ДНК, що в організмі представлена більшою кількістю копій.

Бібліотеки бувають:

• повні - містять із певним ступенем імовірності весь геном організму;
• спеціалізовані - це банк копій якоїсь окремої ділянки генома.

При створенні клонотек треба мати хоча б один ген. Проводять фрагментацію ДНК-рестриктазами. Далі шляхи створення бібліотек розходяться.