Определение колифагов

Колифаги – бактериальные вирусы, способные лизировать E.coli и формировать при t 37±1^оС через 18±2 ч зоны лизиса бактериального газона (бляшки) на питательном агаре.

Используется: тест-культура E.coli K 12F⁺ Str^R.

Применяется титрационный метод качественного и количественного анализа. По эпидемическим показаниям наряду с титрационным методом используется прямой метод определения колифагов.

Принцип прямого метода:

Определение колифагов в питьевой воде путем прямого посева нормируемого объема воды (100мл) и последующего учета зон лизиса (бляшек) на газоне E.coli в чашках Петри с питательным агаром.

Проведение анализа:

1. В расплавленный и остуженный питательный агар (100мл) двойной концентрации добавить 2 мл взвеси тест-культуры E.coli (10⁹ в 1 мл), перемешать.

2. Исследуемую воду (100мл) нагреть до 35-44 ^оС и разлить в 5 чашек. Петри по 20 мл.

3. Сразу же внести в каждую чашку по 20 мл смеси агара с культурой E.coli. Перемешать. Для контроля E.coli на лизогенность в одну чашку внести 20 мл стерильной водопроводной воды.

4. Инкубировать при t 37^оС 18±2 часа.

5. Учесть результаты (схема № 4)

Для проведения текущего контроля качества питьевой воды по вирусологическому показателю применяется титрационный метод определения колифагов.

Принцип метода заключается в предварительном накоплении колифагов в среде с культурой E. coli и последующем выявлении зон лизиса на газоне E. coli.

Тест-культуру E. coli K 12F⁺ Str^R накапливают на скошенном МПА со стрептомицином 18±2 часа при t 37 ^оС, смывают стерильным физиологическим раствором и по стандарту мутности готовят взвесь в концентрации 10⁹ в 1 мл.

СХЕМА № 4