Определение ОКБ и ТКБ методом мембранной фильтрации. 1.Профильтровать 300 мл исследуемой воды:

1.Профильтровать 300 мл исследуемой воды:

вода

к насосу

воронка Зейтца, мембранный фильтр

№ 3 по 100 мл воды через каждый

фильтр

2. поместить фильтры на среду Эндо

фильтры на среде Эндо

3. инкубировать при t 37°С на 24 часа

4. учесть характер колоний на Эндо; красные (lac+) и розовые (lac-)

5. микроскопировать, окрасить по Граму (грамположительные не учитывать)

6. поставить оксидазный тест с колониями грамотрицательных палочек

бумага смоченная

реактивом нет окрашивания-тест(-)-учитывают

α-нафтол+

диметил-фе- синее окрашивание-тест(+)-не учитывают

нилендиамин

7. розовые и красные колонии пересеять на ЛПС, инкубировать при t 37°С, при наличии КГ-учесть как ОКБ

темно-красные колониии отсеять на ЛПС, инкубировать при t 44,5°С, при наличии КГ, учесть как ТКБ

7. результат анализа выразить числом КОЕ ОКБ/ТКБ в 300 мл воды.

Число ОКБ и ТКБ подсчитывают на всех фильтрах и выражают результат анализа в КОЕ ОКБ/ТКБ на 100 мл воды.

Вычисление проводят по следующей формуле: х = (а·100):V, где

х – число колоний в 100 мл;

V – объем воды, профильтрованный через фильтры (300 мл);

а – число подсчитанных колоний на всех фильтрах.