Схема определения БОЕ фагов в воде количественным методом

МПА

E. coli K 12F⁺ Str^R взвесь E. coli K 12F⁺ Str^R

t 37^oC – 18 ± 2 часа 10⁹ в 1 мл в физ. р-ре

Проба воды

100мл 50 мл 10 мл 10 мл 10 мл 10 мл 10 мл

Концентрированный

питательный

бульон 5 мл 1,0 мл 1,0 мл 1,0 мл 1,0 мл 1,0 мл

Взвесь

E.coli K 12F⁺ Str^R 0,5 мл 0,1 мл 0,1 мл 0,1 мл 0,1 мл 0,1 мл

Инкубация при 37± 1^оС 18 ± 2 часа - накопление колифагов

10 мл

Хлороформ 1 мл 1 мл 1 мл 1 мл 1 мл 1 мл

Встряхиваем и инкубируем 15 минут для осаждения хлороформа

Высевы

из пробирок 1 – 6

Взвесь 10 ⁹ 1 0 0 мл расплавленного Разливаем петлей или

E.coli K 12F⁺ Str^R + питательного агара пипеткой

1, 0 мл (44 -45^оС) Опыт на сектора 1 - 6

Инкубация при t 37±1 ^оС в течение 18±2 ч

Контроль

E.coli

Отсутствие зон лизиса Зоны лизиса в секторах

(например,в 10,0 и 10,0)

Результат: количественный подсчет соответствует (по таблице) НВЧ 2,2 колифагов в 100 мл воды.

ТАБЛИЦА № 3