Лабораторная диагностика

При паразитологической диагностике применяются, в основном, те же методы, что и при африканском трипаносомозе. Однако вследствие более низкого уровня и непостоянства паразитемии обнаружить трипаносом в препаратах крови при болезни Шагаса даже в острой стадии нередко удается лишь при повторных исследованиях. Часто при этом приходится применять методы обогащения, а при отрицательных результатах - ксенодиагностику. Для этого выращенных в лабораторных условиях триатомовых клопов, свободных от трипаносом, в небольших садках помещают на кожу больных людей. В положительных случаях при содержании клопов при температуре 30°С через две недели после кормления в их кишечнике накапливается такое количество трипаносом, что обнаружить их не представляет трудностей. Применяется также интраперитонеальное заражение кровью больного лабораторных животных (мышей, морских свинок и др.). Однако в этих случаях результат можно получить лишь через 4 недели.

Для культивирования T.cruzi применяются обычные при выращивании трипаносом и лейшманий среды: кровяной агар, среда NNN, Вейнмана и др.

При серодиагностике обычно используются реакции РНГА, РНИФ и РСК.

Лейшманиозы.

Общие сведения

Лейшманиозы - облигатные трансмиссивные протозойныне заболевания. Их возбудители - лейшмании - относятся, как и возбудители сонной болезни и болезни Шагаса, к семейству Trypanosomatidae, составляя в нем род Leishmania. Жизненный цикл лейшманий протекает со сменой хозяев и включает две формы: амастиготную (безжгутиковую) и промастиготную (жгутиковую). В амастиготной форме лейшмании паразитируют в тканях позвоночных животных и человека; в промастиготной - обитают в различных частях пищеварительного тракта беспозвоночных хозяев - москитов, которые служат их переносчиками, заражая позвоночных животных при кровососании.

Амастиготы имеют овальную или круглую форму. Величина их составляет 3-5 х 1-3 мкм. При окраске по Романовскому-Гимзе видны крупное ядро и мелкий палочковидный или округлый кинетопласт, имеющие красный или красно-фиолетовый цвет. Цитоплазма окрашивается в серо-голубые тона. Иногда она заметна лишь на периферии клетки. В этих случаях отчетливо видны только контур паразита, ядро и кинетопласт.

Удлиненные веретеновидные промастиготы на инфицирующей метациклической стадии имеют величину 10-30 х 3-10 мкм. Ядро лежит в средней части клетки, кинетопласт - ближе к ее переднему концу. От него отходит длинный (20-25 мкм) жгутик.

Обе формы лейшманий размножаются продольным делением, во время которого сначала делятся ядро и кинетопласт, а затем цитоплазма.

Существует несколько видов лейшманий, патогенных для человека, которые сходны по своей морфологии, но отличаются по антигенным, молекулярно-биологческим и биохимическим признакам, а также по клинической картине и эпидемиологии вызываемых ими заболеваний. Переносчики лейшманий - москиты обитают лишь в районах с теплым климатом. Процесс развития промастигот в москитах происходит при температуре свыше 15°С. Поэтому лейшманиозы распространены преимущественно в тропических и субтропических районах.

Можно выделить три основные группы лейшманиозов:

1. Кожный лейшманиоз.

2. Кожно-слизистый американский лейшманиоз.

3. Висцеральный лейшманиоз.

Однако такое деление нельзя считать абсолютным: в ряде случаев возбудители висцеральных форм болезни могут вызывать кожные поражения, а возбудители кожных форм - поражения внутренних органов.

Кожный лейшманиоз включает зоонозную (ЗКЛ) и антропонозную (АКЛ) формы, встречающиеся в Восточном полушарии, а также мексиканский кожный лейшманиоз Западного полушария.

Возбудителем ЗКЛ является L.major. Проникая в кожу при укусе москитов, промастиготы фагоцитируются макрофагами, внутри которых превращаются в амастиготы и размножаются, вследствие чего макрофаги разрушаются, а амастиготы проникают в новые макрофаги, скапливающиеся в месте воспалительной реакции. Через 2-4 недели на месте внедрения возбудителя появляется безболезненный фурункулоподобный бугорок, а затем язва с неровными подрытыми краями, окруженная инфильтратом, которая через 2-4 месяца заживает.

Антропонозный кожный лейшманиоз (АКЛ), возбудителем которого является L.tropica, отличается длительным инкубационным периодом (от 2 месяцев до 2 лет и более), затяжным течением болезни и проявляется на коже в виде одного или нескольких бугорков (инфильтратов). Иногда возникают диффузно-инфильтрирующие лейшманиомы, поражающие значительные участки кожи (туберкулоидная форма). АКЛ распространен в основном в областях древней цивилизации Средиземноморья, Средней Азии, Юго-Западной и Южной Азии, до Афганистана и Индии. Заболевания отмечаются как в больших городах, так и в небольших населенных пунктах в сельской местности.

Мексиканская форма кожного лейшманиоза (возбудитель L.mexicana) встречается на юге Мексики (полуостров Юкатан), в Гватемале и в сопредельных государствах. Зооноз, природные очаги которого связаны с ландшафтами влажных тропических лесов. Чаще возникает одна лейшманиома, преимущественно на коже уха, которая заживает без осложнений. Однако нередки случаи (около 40%) хронического течения болезни с глубокими язвами и разрушением хрящевой ткани ушей, носа, гортани.

Кожно-слизистый американский лейшманиоз имеет несколько нозологических форм, возбудители которых относятся к комплексу

L.braziliensis. Наиболее тяжелая форма - бразильский лейшманиоз (эспундия), при которой в 80% случаев кроме язв на коже в месте введения возбудителя возникают также обширные поражения слизистых оболочек носа, глотки, гортани, а также хрящей мягких тканей и даже костей.

Висцеральный лейшманиоз (ВЛ) имеет разные формы,вызываемые различными видами лейшманий: L.donovani (Индия), L.infantum (Средняя Азия, Закавказье, Средиземноморье), L.chagasi (Южная Америка) и др. Отдельные формы ВЛ имеют свои особенности. Наиболее обособленную группу составляют L.infantum и близкая к ней L.chagasi, которые вызывают заболевания преимущественно у детей. Для всех форм висцерального лейшманиоза характерно, что лейшмании не остаются на месте инокуляции в кожу, а диссеменируют по всей РЭС. Особенно интенсивно они размножаются в ретикулоэндотелии крупных паренхиматозных органов: селезенки, печени и костного мозга. В периферической крови отмечается анемия, выраженная лейкопения, агранулоцитоз, тромбоцитопения, резкое возрастание СОЭ, значительное увеличение содержания гаммаглобулинов.