Определение резус-фактора

Исследование крови на резус-принадлежность методом конглютинации проводится с помощью специальных антирезус-сывороток в лабораторных условиях. В экстренных случаях допускается определение резус-фактора экспресс-методом у постели больного ребенка. Предварительно проводится определение групповой принадлежности по системе АВО. Необходимое оснащение:

1. 2 различные серии стандартных антирезус-сывороток, соответствующих групповой принадлежности определяемой крови, или совместимые в групповом отношении стандартные отмытые одногруппные резус-положительные и резус-отрицательные эритроциты.

2. Чашка Петри.

3. Водяная баня.

4. Пипетки для сывороток.

5. Предметные стекла или стеклянные палочки.

На чашку Петри наносят подряд 3 большие капли антирезус-сыворотки одной серии и параллельно – 3 капли сыворотки другой серии; получается два горизонтальных ряда сывороток. Затем в первый вертикальный ряд сывороток обеих серий вносят по небольшой капле исследуемой крови (соотношение сыворотки и крови 10:1 или 5:1), в средний ряд – по такой же капле стандартных резус-положительных эритроцитов (контроль активности) и в третий ряд – стандартные резус-отрицательные эритроциты (контроль специфичности). Отдельной для каждой капли стеклянной палочкой или углом предметного стекла тщательно перемешивают сыворотку и эритроциты, чашки закрывают крышкой и помещают на водяную баню при температуре 46-48°С. Спустя 10 минут, учитывают результат, просматривая чашку в проходящем свете. В капле со стандартными резус-положительными эритроцитами должна быть агглютинация, а в капле с резус-отрицательными эритроцитами она должна отсутствовать. Если в каплях обеих серий сывороток с исследуемыми эритроцитами определяется агглютинация, кровь резус-положительная, если она отсутствует – кровь резус-отрицательная.

Для экспресс-метода определения резус-фактора используют:

• специальный реагент – антирезус-сыворотку IV (АВ) группы

• разведенный 20-30% раствор альбумина, используемого как конглютин (вещество, способствующее агрегации эритроцитов при комнатной температуре).

Каплю стандартной антирезус-сыворотки IV (АВ) группы наносят на предметное стекло или чашку Петри и параллельно наносят каплю резус-отрицательной сыворотки IV (АВ), не содержащей антител. К ним добавляют в 2-3 раза меньшего объема каплю исследуемой крови, перемешивают углом предметного стекла, стеклянной палочкой или путем покачивания в течение 3-4 минут, после чего добавляют по 1 капле изотонического раствора хлорида натрия и по истечении 5 минут учитывают реакцию. При наличии агглютинации эритроцитов с антирезус-сывороткой и отсутствии с контрольной сывороткой – кровь резус-положительная, при отсутствии агглютинации с обеими сыворотками – исследуемая кровь резус-отрицательная. В случаях появления агглютинации с обеими сыворотками реакцию следует рассматривать как сомнительную и для экстренного переливания использовать только резус-отрицательную кровь.