Алгоритм постановки реакции

1. Видовую противовирусную сыворотку развести от 1:10 до 1:2560

2. По 0,25 мл каждого разведения сыворотки внести в лунки планшета

3. В каждую лунку добавить по 0,25 мл материала, содержащего вирус, разведенного в 4 раза меньше титра, установленного в РГА.

4. После термостатирования в каждую лунку добавить по 0,5 мл — 1-2% взвесь эритроцитов.

5. Поместить в термостат на 30 минут, или выдержать 45 минут при комнатной температуре.

Реакция сопровождается тремя контролями:

1. Контроль сыворотки: 0,25 мл сыворотки (1:10) + 0,25 мл физ. раствора поместить в термостат на 30 минут. Добавить 0,5 мл 1-2% взвеси эритроцитов и поместить в термостат на 30 минут или выдержать 45 минут при комнатной температуре.

2. Контроль антигена: 0,25 материала с искомым вирусом +0,25 мл физ. раствора поместить в термостат на 30 минут. Добавить 0,5 мл 1-2% взвеси эритроцитов и поместить в термостат на 30 минут или выдержать 45 минут при комнатной температуре.

3. Контроль эритроцитов: 0,5 физ. раствора поместить в термостат на 30 минут. Добавить 1-2% взвесь эритроцитов, поместить в термостат на 30 минут или выдержать 45 минут при комнатной температуре.

Учет реакции начинается с контролей. Во всех контрольных лунках «пуговки» - торможение гемагглютинации. В рабочих лунках: если сыворотка не подошла вирусу, то в лунках «зонтики». Титр сыворотки — это ее максимальное разведение, в котором происходит задержка гемагглютинации.