Порядок выполнения работы. 1. Приготовить исходный 1,5 % раствор желатина при нагревании и охладить

1. Приготовить исходный 1,5 % раствор желатина при нагревании и охладить.

2. Приготовить 9 растворов желатина с добавлением кислоты, щелочи и воды.

3. Измерить точное значение рН всех растворов с помощью рН метра.

4. Измерить оптическую плотность D приготовленных растворов на фотоэлектрокалориметре.

5. Построить зависимость D =f(pH) и определить ИЭТ желатина.

6. Изучить влияние индифферентных электролитов на конформационное состояние молекулы белка.

Готовят 100 мл 1,5% раствора в стаканчике, предварительно замачивают его для набухания, фильтруют в горячем виде, охлаждают и вносят пипеткой по 10 мл в пронумерованные пробирки. Затем добавляют определенные объемы кислоты, щелочи и воды до нужных значений рН, пользуясь таблицей 10.

Таблица 10.

Номер стаканчика
Раствор желатина 1,5%, мл
Раствор 0,05 н HCl, мл				0,5	-	-	-	-	-
Раствор 0,01 н NaOH, мл	-	-	-	-	-
Дистиллированная вода, мл	-			9,5					-
Общий объем воды, мл
рН раствора

Измеряют рН всех приготовленных растворов. Для этого в ячейку рН метра наливают по 1,5 мл раствора и соединяют со стеклянным электродом. Определяют рН вначале по грубой шкале, а потом по точной с интервалом в три единицы рН.

Ячейку и электрод после каждого измерения тщательно промывают водой. Точное значение рН вносят в таблицу 11.

Таблица 11.

Номер стаканчика
Точное значение рН
Оптическая плотность раствора, D
Мутность раствора, τ

Далее измеряют оптическую плотность D всех приготовленных растворов на КФК 3. Для измерения используют кюветы длиной 3 см, а светофильтр с длинной волны 364 нм. Растворы после измерений сливают обратно в пробирки, а кюветы тщательно промывают водой. Экспериментальные данные заносят в таблицу 11. Мутность растворов τ рассчитывают по формуле:

где lдлина кюветы.

Строят зависимость τ=f(pH) и определяют изоэлектрической точки желатина по максимальной мутности растворов. По заданию преподавателя кислотность в некоторых растворах измеряют и исследуют влияние индифферентных электролитов на заряд и форму молекул желатина.

Контрольные вопросы.

1. В чем особенности белков как амфолитов?

2. Как диссоциируют ионогенные группы макромолекулы белка в зависимости от величины рН?

3. Что такое изоэлектрическая точка белка?

4. Как влияет рН раствора на форму молекул полиамфолитов?

Лабораторная работа № 7.

Определение критической концентрации мицеллообразования (ККМ) в растворах ПАВ методом измерения электропроводности и поверхностного натяжения.

Цель работы: Изучение мицеллообразования в растворах ПАВ и их солюбилизирующей способности.