Обнаружение фенацетина по продуктам его гидролиза

Большинство реакций обнаружения фенацетина, выделенного из биологического материала, сводится к обнаружению п-аминофенола. Для выполнения реакций на п-аминофенол используется кислая хлороформная вытяжка. С этой целью 0,5 мл хлороформной вытяжки вносят в маленькую пробирку, которую нагревают на водяной бане (50~55°С) до полного испарения хлороформа. Сухой остаток растворяют в 1-2 мл концентрированной хлороводородной кислоты и нагревают пробирку на пламени горелки до тех пор, пока объем жидкости уменьшится примерно в половину. Содержимое пробирки охлаждают и прибавляют равный объём воды. Полученный гидролизат разливают в несколько пробирок, в когорых определяют наличие п-аминофенола при помощи реакций образовании индофенолового красителя, аммонийной соли индофенолового красите­ля и реакции образования азокрасителя.

Реакция образования индофенолового красителя. От прибавления ангидрида хромовой кислоты к полученному гидролизату появляется виш­нево-красная окраска.

Выполнение реакции. К гидролизату прибавляют каплю 2%-го ра­створа ангидрида хромовой кислоты или каплю 5%-го раствора дихро­мата калия. Появление фиолетовой окраски, переходящей в вишнёво- красную, указывает на наличие и-аминофенола в пробе.

Реакция образования аммонийной соли индофенолового красителя. От прибавления раствора фенола, хлорной извести и аммиака к гидролизату появляется синяя окраска.

Выполнение реакции. К гидролизату прибавляют каплю 5% раствора фенола и 2-3 капли свежеприготовленного раствора хлорной извести (2 г хлорной извести взбалтывают с 20 мл воды и фильтруют). При взбалтывании полученной смеси появляется красно-фиолетовая окраска.От прибавления раствора аммиака указанная окраска переходит синюю. Появление синей окраски указывает на наличие п-аминофенола в пробе.

Реакция образования азокрасителя. От прибавления нитрита натрия, кислоты, а затем нафтола к гидролизату образуется азокрастель.

Выполнение реакции. К гидролизату по каплям прибавляют 15 раствор нитрита натрия до тех пор, пока не начнёт синеть йодокрахмальная бумага, смоченная этой жидкостью. Затем в пробирку вносят несколько капель щелочного раствора β-нафтола. При наличии в растворе п аминофенола (продукта гидролиза фенацетина) появляется красноя окраска или выпадает такого же цвета осадок.

Приготовление иодокрахмальной бумажки. Небольшое количество рисового или картофельного крахмала тщательно перемешивают небольшим количеством воды. Полученную суспензию малыми пор­циями вливают в кипящую воду, перемешивают стеклянной палочкой и продолжают кипятить до получения прозрачного раствора. К охлаж­денному раствору крахмала прибавляют немного чистого йодида ка­лин. Этим раствором пропитывают полоски фильтровальной бумаги, которые затем высушивают.

Реакция образования 3-нитрофенацетина. При нагревании фенацетина с азотной кислотой образуется 3-нитрофенацетин, имеющей жёл­тую окраску.

Выполнение реакции. 1-2 мл хлороформной вытяжки вносят в про­бирку, которую затем нагревают на водяной бане до полного испарения жидкости. К сухому остатку прибавляют 1 мл 50% азотной кислоты и нагревают на водяной бане. При наличии фенацетина в вытяжке появля­ется жёлтая окраска или выпадает такого же цвета осадок. При наличии больших количеств фенацетина появляется оранжево-красная окраска

При помощи этой реакции можно отличить фенацетин от антипирина и антифебрина.

Обнаружение фенацетина по УФ. ИК-спектрам. Раствор фенацетина в этиловом спирте имеет максимум поглощения при 250 нм; в ИК области спектра фенацетин (диск с бромидом калия) имеет основные пики при 1243, 1655, 1513 и 1555 см^-1.

Предварительная проба на наличие фенацетина в моче. Эта проба основана на том, что фенацетин и его метаболит парацетамол в организме подвергается биотрансформации, в результате которой, образуется п-аминофенол. По наличию п-аминофенола в моче делают вывод о том, что лицом, моча которого, подвергается исследованию был принят фенацетин или парацетамол.

Эта предварительная проба выполняется таким образом: к 1 мл мочи
прибавляют 2-3 капли 10% раствора хлороводородной кислоты и охлаждают.
Затем к охлажденной смеси прибавляют 2-3 капли 1 % раствора нирита натрия и 2-3 капли 1 % свежеприготовленного раствора α-нафтола в 10% растворе гидроксида натрия. Появление красной окраскиуказывает на наличие п-аминофенола в моче. Большой избыток α-нафтола мешает этой реакции