Опыт № 1. Влияние рН на набухание и определение изоэлектрической точки желатина

Оборудование, химическая посуда и реактивы: бюретки на 25 мл, штатив для пробирок, пробирки на 20 мл, мерные пробирки на 10 мл, стеклянные палочки, желатин, дистиллированная вода, 0,1 н. раствор CН3СООН, 0,1 н. раствор CН3СООNa.

Порядок выполнения работы:

1. В 5-ти пробирках составьте буферные смеси согласно таблице:

Таблица

№	Состав буферной смеси, мл	рН смеси	Объем жела-тина до набу-хания, V1, мл	Объем желати-на после набу-хания, V1, мл	Вели чина набу- ха-ния, ∆V, мл	Степень набухания, α= ·100%
1,0 н CН3СООН	0,1 н. CН3СООNa	расч.	эксп.

2. Рассчитайте рН буферных растворов по уравнению Гендерсона-Гассельбаха:

3. Измерьте значение рН каждой буферной смеси с помощью рН-метра.

4. В 5 сухих мерных пронумерованных пробирок внесите по 1 г порошка желатина и добавьте в каждую приготовленные буферные растворы. Содержимое пробирок перемешайте палочкой, которую затем удалите.

5. Через 30 минут определите объем набухшего желатина и рассчитайте изменение объема желатина и степень набухания.

6. Результаты занесите в таблицу.

7. Постройте график зависимости величины набухания от рН среды. По графику определите ИЭТ желатина.

8. Сделайте вывод о влиянии рН на набухание. Объясните, почему белок минимально набухает в ИЭТ? Что такое изоэлектрическая точка?

Рис.6.6. Степень набухания желатина в средах с различным значением рН.