Лабораторная работа № 15.3

Определение группы крови человека с использованием цоликлонов анти - А и анти - В

Групповую принадлежность крови человека определяет совокупность генетически детерминированных эритроцитарных агглютиногенов и плазменных агглютининов. В основе разделения крови людей на четыре группы в системе АВ0 лежит наличие или отсутствие в мембране эритроцитов агглютиногенов А и В, а в плазме крови агглютининов α и β. При взаимодействии одноименных агглютиногенов и агглютининов происходит реакция изогемагглютинации, т.е. склеивание эритроцитов.

В настоящее время для определения групп крови человека широко используют синтетические цоликлоны – растворы с аналогами агглютининов α и β. Этот метод надежен и прост: агглютинация происходит между одноименными агглютиногенами исследуемой крови и агглютининами цоликлонов (анти-А и анти-В). Цоликлоны являются продуктом гибридомных клеточных линий, полученных в результате слияния мышиных антителообразуюших В-лимфоцитов с клетками мышиной миеломы.

Цель: определить группу крови человека в системе АВ0.

Объект исследования: человек.

Оборудование и материалы: игла-скарификатор, тарелка с маркировкой «анти-А» и «анти-В», предметное стекло, цоликлоны анти-А и анти-В, растворитель для цоликлонов, спирт, настойка йода, вата, почкообразный тазик.

Порядок выполнения. Поместить цоликлоны на тарелку (по 0,1 мл). Проколоть палец, получить каплю крови. Одним уголком покровного стекла внести небольшое количество крови в цоликлон анти-А, другим уголком – в цоликлон анти-В. Перемешать, покачивая тарелку. Агглютинация обычно наступает через 3–5 с. Наблюдение следует вести 2–3 мин ввиду возможности более позднего наступления агглютинации с эритроцитами, содержащими слабые разновидности антигенов А и В. При неотчетливой реакции 2–3 мин подержать тарелку под настольной лампой, нагревая реагирующие компоненты.

Результаты. Оценить реакции агглютинации с цоликлонами анти-А и анти-В по Таблице 15.2.

Таблица 15.2.

Определение группы крови по реакции исследуемых эритроцитов

Выводы. Указать группу крови человека в системе АВ0 и обосновать свое заключение.