Определение количества лейкоцитов в крови

Цель: определить количество лейкоцитов в 1 л крови.

Объект исследования: человек.

Оборудование и материалы: игла-скарификатор, микроскоп, смеси-тель для забора крови, счетная камера с сеткой Горяева, покровное стекло, стеклянная чашечка, 3% раствор уксусной кислоты (подкрашенный мети-леновой синью), марлевые салфетки, вата, спирт, настойка йода, почкообраз-ный тазик.

Порядок выполнения. Обработать и проколоть палец так же, как указано в лабораторной работе № 14.1. Набрать кровь в смеситель для лейкоцитов до метки «0,5». Из чашечки в смеситель набрать раствор уксусной кислоты, подкрашенной метиленовой синью до метки «11» (разведение в 20 раз). Затем снять резиновую трубку, захватить меланжер между большим и средним пальцами и сильно встряхнуть в различных направлениях. Кислота разрушает оболочки эритроцитов и лейкоцитов. От лейкоцитов остаются их ядра, которые окрашиваются метиленовым синим и становятся хорошо видны при подсчете.

Притереть покровное стекло к камере для подсчета форменных элементов. Первую каплю разведенной крови выпустить из смесителя на ватку и следующей каплей заполнить счетную камеру. Подсчитать количество лейкоцитов в 50 больших квадратах, что соответствует 800 малым квадратами (можно подсчитать количество лейкоцитов в 25 больших квадратах, и удвоить полученную величину). Считать при малом увеличении (×8 или ×10). Порядок подсчета лейкоцитов в квадратах следующий: первый ряд – слева направо, второй ряд – справа налево, третий ряд – слева направо и т.д. Количество лейкоцитов в 1 л крови определить по формуле:

где: Л – искомое число лейкоцитов; N – число подсчитанных лейкоцитов.

Для подсчёта лейкоцитов крови может быть использован пробирочный метод, предложенный Н.М. Николаевым. Для этого в лабораторную пробирку (сухую и чистую) длиной от 10 см и поперечником до 1 см наливают заранее 0,4 мл раствора уксусной кислоты (1–3%) с помощью градуированной пипетки на 1–2 мл.

Набирают из пальца кровь в капилляр от гемометра Сали до метки: 20 мм³ и добавляют в пробирку. Тем самым в пробирке с уксусной кислотой получается требуемое разведение лейкоцитов в 20 раз.

Перед подсчётом проводится размешивание отстоявшейся разведенной крови в течение 2–3 минут. При этом пробирку зажимают между указательным, средним и большим пальцами левой руки и размешивают энергичным встряхиванием.

После размешивания забирают из пробирки круглым спаянным концом тонкой стеклянной палочки каплю жидкости и вносят ее под притёртое стекло счетной камеры. Дав отстояться крови в камере, через 2–3 минуты приступают к подсчёту.

Результаты. Указать подсчитанное количество лейкоцитов.

Выводы. Сравнить полученное число лейкоцитов с их нормальным содержанием в крови. В норме у взрослого человека в крови содержится (4–9)∙10⁹/л лейкоцитов.