Характеристика возбудителей. Таксономия.Возбудители туберкулеза относятся к семейству Mycobacteriaceae, роду Mycobacterium и объединены в комплекс Mycobacterium tuberculosis

Таксономия. Возбудители туберкулеза относятся к семейству Mycobacteriaceae, роду Mycobacterium и объединены в комплекс Mycobacterium tuberculosis, который включает M. tuberculosis - человеческий вид, M. bovi - бычий вид и M. africanum - промежуточный вид.

Морфология и тинкториальные свойства. Возбудители туберкулеза характеризуются выраженным полиморфизмом. Они имеют форму длинных тонких (M. tuberculosis) или коротких толстых (M. bovis), прямых или слегка изогнутых палочек, неподвижны, спор не образуют, имеют микрокапсулу (поверхностный слой микозидов). Клеточная стенка микобактерий имеет сложное строение. Первичный каркас клеточной стенки, образованный пептидогликаном, как у грамположительных бактерий, дублирует слой арабиногалактана. Наружные слои клеточной стенки представлены липидами.

показано 26 из 95

стр. 26

Родовой признак микобактерий - кислото-, спирто- и щелочеустойчивость, что обусловлено наличием миколовых кислот в клеточной стенке бактерий. Вследствие большого содержания липидов в клеточной стенке микобактерии плохо воспринимают анилиновые

красители. Для их выявления применяют окраску по Цилю-Нильсену. В препаратах микобактерии образуют скопления из ярко-красных кислотоустойчивых палочек. Могут образовывать L-формы бактерий, которые длительно персистируют в организме и индуцируют противотуберкулезный иммунитет.

Культивирование и биохимические свойства. Возбудители туберкулеза - аэробы, характеризуются медленным ростом, требовательны к питательным средам. Для культивирования применяют элективную среду Левенштейна-Йенсена, содержащую соли, глицерин, яичный желток, тертый картофель и малахитовый зеленый для ингибирования роста сопутствующей микрофлоры. Возбудители туберкулеза обладают термолабильной каталазой.

М. tuberculosis глицеринозависимый, синтезирует ниацин, в отличие от M. bovis редуцирует нитраты в нитриты. На жидких средах через 5-7 дней образует на поверхности морщинистую пленку. На плотных средах рост отмечается на 3-4-й неделе культивирования в виде светло-кремовых морщинистых колоний в R-форме. К М. tuberculosis наиболее чувствительны морские свинки.

M. bovis - микроаэрофил, устойчив к пиразинамиду, растет на средах медленнее, чем М. tuberculosis, пируватозависимый. На плотных питательных средах образует мелкие шаровидные серовато-белые колонии (S-формы), на жидких средах - влажную пленку. Из лабораторных животных к M. bovis наиболее восприимчивы кролики.

M. africаnum - промежуточный по свойствам вид, входящий в состав M. bovis complex, малопатогенный для человека, выделяется от больных туберкулезом в тропической Африке. В лабораториях нашей страны данный вид не идентифицируют.

показано 27 из 95

Факторы патогенности и антигенная структура. Основные патогенные свойства возбудителей туберкулеза обусловлены прямым или иммунологически опосредованным действием липидов и липидсодержащих структур. Липиды включают миколовые кислоты, фосфатиды, воск D, cord-фактор, который является гликолипидом, состоящим из трегалозы и димиколята. Эти компоненты обусловливают устойчивость к кислотам, спиртам и щелочам, препятствуют фагоцитозу, нарушают проницаемость лизосом, вызывают развитие специфических гранулем, разрушают митохондрии клеток, являются адъювантами.

Вирулентные штаммы, обладающие cord-фактором (от англ. cord - «жгут, веревка»), при микрокультивировании на стеклах в жидкой среде (метод Прайса) через 48-72 ч склеиваются друг с другом, формируя параллельные тяжи (рис. 10.1). Авирулентные штаммы при аналогичном культивировании растут беспорядочно.

Рис. 10.1. Cord-фактор

Туберкулопротеиды составляют 56% сухой массы клетки. Они являются основными носителями антигенных свойств микобактерий, высокотоксичны, участвуют в развитии ГЗТ.

Резистентность. Благодаря наличию липидов, микобактерии в окружающей среде более устойчивы к действию неблагоприятных факторов. При кипячении они погибают через 5 мин, а при пастеризации - в течение 30 мин. Под воздействием УФ-лучей возбудители погибают через 2-3 мин, поэтому распространение их вне помещения в дневное время происходит редко. Для дезинфекции используют активированные растворы хлорамина и хлорной извести, вызывающие гибель данных микроорганизмов в течение 3-5 ч.

Эпидемиология. Туберкулез распространен повсеместно и является социальной проблемой. Основной источник инфекции - человек, больной туберкулезом органов дыхания, выделяющий возбудителей в окружающую среду с мокротой. Больные сельскохозяйственные животные и больные нелегочной формой туберкулеза люди, выделяющие возбудителей с мочой и калом, играют второстепенную роль. Основные пути передачи инфекции - воздушно-капельный и воздушно-пылевой. Реже заражение может происходить пищевым (при употреблении термически необработанных мясо-молочных продуктов) и контактным путями. Внутриутробный путь заражения встречается крайне редко. M. tuberculosis вызывает у человека туберкулез в 92% случаев, M. bovis - в 5%, M. africanum - в 3% случаев.

показано 28 из 95

стр. 28

из

Микробиологическая диагностика. Проводят с помощью бактериоскопии, бактериологического исследования и постановки биологической пробы. Все методы направлены на обнаружение микобактерий в патологическом материале: мокроте, промывных водах бронхов, плевральной и спинномозговой жидкостях, кусочках тканей из органов и др. Обязательно определяют чувствительность выделенных чистых культур микобактерий к антибиотикам с помощью метода абсолютных концентраций на среде Левенштейна-Йенсена или ПЦР.

Ускоренный метод бактериологической диагностики - метод микрокультур Прайса, а также полностью автоматизированные методы культивирования в жидких средах, основанные на флюорометрическом определении накопившегося в процессе размножения микобактерий CO₂ или уменьшения количества используемого бактериями О₂. Автоматизированные системы культивирования применяют также для определения чувствительности к противотуберкулезным препаратам. Туберкулинодиагностика основана на определении повышенной чувствительности организма к туберкулину, который впервые получил Р. Кох. Старый туберкулин - концентрированный фильтрат 6-недельной бульонной культуры. Помимо туберкулопротеинов, он содержит другие компоненты клеток и компоненты среды. Его применяют только в накожной пробе Пирке. Чаще ставят внутрикожную пробу Манту с ППД-Л (Purified Protein Derivate) - очищенным белковым дериватом, очищенным туберкулином. У лиц, не имевших контакта с микобактериями, реакция на ППД отсутствует. У людей с первичным инфицированием реакция в виде отека и эритемы проявляется через 48-72 ч.

Экспресс-диагностика туберкулеза основана на применении РИФ, а также комплексного использования бактериоскопического метода и ПЦР. Для массового обследования населения, раннего выявления активных форм туберкулеза можно использовать ИФА, направленный на обнаружение специфических АТ.