Главная Случайная страница Контакты | Мы поможем в написании вашей работы! | ||
|
Задание 1. Определить содержание общего, связанного и свободного билирубина в сыворотке крови методом Иендрашика, Клеггорна и Гроффа.
Принцип. Метод базируется на способности связанной и диссоциированной формы свободного билирубина образовывать при взаимодействии с диазофенилсульфоновой кислотой азобилирубин розово-фиолетового цвета. Свободный билирубин переводится в растворимое диссоциированное состояние кофеиновым реактивом, благодаря чему в этой пробе определяется общий билирубин. По разности между общим и связанным билирубином находят концентрацию свободного.
Ход работы. В три пробирки вносят, в соответствии с таблицей, необходимые ингредиенты и тщательно перемешивают.
Реактивы | Общий билирубин, мл | Связанный билирубин, мл | Контроль, мл |
Сыворотка | 0,5 | 0,5 | 0,5 |
Кофеиновый реактив | 1,75 | - | 1,75 |
Раствор натрия хлорида | - | 1,75 | 0,25 |
Диазореактив | 0,25 | 0,25 | - |
При определении общего билирубина пробы оставляют стоять на 20 мин для развития окраски, а связанного - на 5-10 мин (при более продолжительном стоянии в реакцию вступает свободный билирубин). По окончании указанного времени фотометрируют каждую пробу против воды на ФЭК при длине волны 520-560 нм (зеленый светофильтр) в 5 мм кювете. Из полученных экстинкций общего и связанного билирубина отнимают экстикцию контрольной пробы (контроль на мутность сыворотки) и находят содержание общего и связанного билирубина (в мкмоль/л) по калибровочному графику. Свободный билирубин рассчитывают по разности между количеством общего и связанного. Рассчитывают содержание общего билирубина и его фракций в сыворотке крови и делают вывод о причинах возможных отклонений этих показателей.
Клинико-диагностическое значение. В норме содержание общего билирубина в сыворотке крови составляет 4,0-21,0 мкмоль/л; из этого количества 75% приходится на долю свободного билирубина (6,0-15,0 мкмоль/л) и 25% на долю связанного (2,0-5,0 мкмоль/л). К основным факторам, которые вызывают нарушение обмена жёлчных пигментов, принадлежат: повышенный гемолиз эритроцитов, нарушение синтеза билирубинглюкуронидов, нарушение выделения связанного билирубина из гепатоцитов в жёлчные капилляры (деструкция гепатоцитов), нарушение жёлчевыделения вследствие обтурации внепечёночных жёлчевыводящих путей. Паренхиматозная желтуха возникает при гепатитах, циррозах печени и характеризуется резким повышением содержания связанного билирубина в крови. В печени снижается образование билирубинглюкуронида, вследствие этого содержание свободного билирубина в крови также увеличивается. Гемолитическая желтуха возникает при усиленном гемолизе эритроцитов, что приводит к усилению образования свободного билирубина, так как печень не успевает его связывать. Увеличение концентрации связанного билирубина в случае обтурационной желтухи обусловлено перенаполнением жёлчных путей вследствие закупорки, разрыва и в дальнейшем переходе компонентов жёлчи в кровь; при этом в крови накапливается связанный билирубин (гипербилирубинемия), из мочи исчезает уробилиноген, однако вследствие билирубинурии она приобретает тёмную окраску, а из кала исчезает стеркобилин. В клинико-биохимических лабораториях проводят определение содержания билирубина и его фракций для дифференциальной диагностики желтух.
ЛИТЕРАТУРА
1. Губський Ю.І. Біологічна хімія. – Київ-Тернопіль: Укрмедкнига, 2000. – С. 462-467.
2. Губський Ю.І. Біологічна хімія. Підручник. – Київ-Вінниця: Нова книга, 2007. – С. 577-584.
3. Гонський Я.І., Максимчук Т.П., Калинський М.І. Біохімія людини: Підручник. – Тернопіль: Укрмедкнига, 2002. – С. 562-566.
4. Березов Т.Т., Коровкин Б.Ф. Биологическая химия. – М.: Медицина, 1998. – С. 506-508, 561-565.
5. Биохимия: Учебник / Под ред. Е.С. Северина. – М.: ГЭОТАР-МЕД, 2003. – С. 645-655.
6. Лабораторні та семінарські заняття з біологічної хімії: Навч. посібник для студентів вищих навч. закл. / Л.М. Вороніна, В.Ф. Десенко, А.Л. Загайко та ін. – Х.: Вид-во НФаУ; Оригінал, 2004. – С. 209-212.
ЗАНЯТИЕ 7
Тема: Биохимия почек и мочи. Физико-химические свойства и химический состав мочи в норме. Биохимическое исследование мочи.
Актуальность. Почки - один из важнейших органов, основное назначение которого заключается в поддержании динамического постоянства внутренней среды организма. Почки принимают участие в регуляции водно-электролитного баланса, кровяного давления, поддержке кислотно-щелоч-ного состояния, осмотического давления жидкостей организма; стимуляции эритропоэза и др. Почки вырабатывают мочу из компонентов плазмы крови. С мочой выделяется до 150 разных веществ. В суточной моче содержится в среднем около 40 г органических веществ и приблизительно 20 г неорганических. Биохимическое исследование мочи играет важную роль в клинике для диагностики и прогноза заболевания, контроля эффективности лечения.
Цель. Ознакомиться с основными физико-химическими свойствами мочи (диурез, рН, плотность, цвет, прозрачность, запах) и химическим составом нормальной мочи. Ознакомиться с методами клинического и биохимического анализа мочи. Запомнить некоторые физико-химические константы и биохимические показатели мочи в норме с целью использования их для диагностики заболеваний, правильной оценки отклонений от нормы.
ЗАДАНИЯ ДЛЯ САМОСТОЯТЕЛЬНОЙ РАБОТЫ
ТЕОРЕТИЧЕСКИЕ ВОПРОСЫ
1. Функции почек и особенности обмена веществ в них.
2. Биохимические механизмы регуляции функции почек.
3. Общие свойства и химический состав нормальной мочи. Значение исследования в клинике.
4. Органическое и неорганическое вещества нормальной мочи. Их изменения в зависимости от возраста.
5. Физико-химические показатели мочи: диурез, относительная плотность, рН, запах, цвет, прозрачность. Значение их исследования. Возможные отклонения от нормы.
6. Клинико-диагностическое значение количественного и качественного анализа мочи.
ТЕСТОВЫЕ ЗАДАНИЯ ДЛЯ САМОКОНТРОЛЯ
1. У спортсмена, который находился на диете с большим количеством белков, установлена кислая реакция мочи. Наличие каких веществ приводит к таким изменениям?
А.Хлориды и фосфаты. С.Фосфаты и сульфаты. В. Хлориды и сульфаты. D. Ураты и сульфаты. | Е. Ураты и хлориды. |
2. Прозрачность мочи является одним из параметров, которые оцениваются при её анализе. С наличием каких веществ может быть связано помутнение мочи, имеющей щелочную реакцию?
А. Фосфата кальция. В. Сульфата магния. | С. Уратов. D. Хлоридов. | Е. Солей аммиака. |
3. Почки выполняют все функции, кроме:
А. Выделяют конечные продукты обмена. В. Регулируют водно-солевой обмен. С. Поддерживают осмотическое давление. | D. Регулируют артериаль- ное давление крови. Е. Раскладывают мочевину на СО2 и Н2О. |
4. Органоспецифическим ферментом почек является:
А. Лактатдегидрогеназа. В. Сукцинатдегидрогеназа. С. Аспартатаминотрансфераза. | D. Трансамидиназа. Е. Креатинфосфокиназа. |
5. В результате фильтрации плазмы крови в первичную мочу переходят все вещества, кроме:
А. Моносахаридов (глюкозы и фруктозы). В. Мочевины и мочевой кислоты. С. Низкомолекулярных белков. | D. Креатина и креатинина. Е. Средне- и высокомоле- кулярных белков. |
6. Поддержание постоянства рН в организме с помощью почек осуществляется в процессе реабсорбции ионов Na+ и секреции Н+. В основе их действия лежат все перечисленные химические процессы, за исключением:
A. Реабсорбция Na+ во время преобразования двузамещённых фосфатов
в однозамещённые.
B. Избирательное всасывание ионов Na+ в клетках канальцев взамен на
ионы Н+, идущих в просвет канальцев.
C. Диссоциация Н2СО3 на НСО3- и Н+, последний выводится из организма. D.Задержке ионов Na+ способствуют реакции образования аммиака и
использование его для нейтрализации кислых метаболитов.
E. Выведение мочевины с мочой.
7. Для диагностики заболевания мутную мочу с щелочной реакцией подкислили и подогрели. При этом осадок исчез. Чем обусловлена мутность мочи?
А. Слизь из мочевыводящих путей. В. Микрофлора, которая раскладывает мочевину с образованием аммиака. С. Гной из уретры. | D. Белок почечного проис- хождения. Е. Фосфаты кальция и маг- ния, ураты. |
8. Какой из физико-химических показателей мочи зависит от диуреза?
А. Цвет. В. рН. С. Относительная плотность.
D. Запах. Е. Прозрачность.
9. Какие из приведенных показателей рН и относительной плотности мочи взрослого человека отвечают норме?
А. рН=4,8; плотность 1,001. В. рН=8,0; плотность 1,040. С. рН=8,5; плотность 1,029. | D. рН=3,5; плотность 1,020. Е. рН=6,0; плотность 1,021. |
10. Как можно определить патологическое состояние взрослого человека, у которого наблюдается прекращение выделения мочи?
А. Энурез. В. Олигурия. С. Анурия. D. Никтурия. Е. Дизурия.
11. Как можно определить патологическое состояние взрослого человека, у которого суточный диурез составляет 500 мл?
А. Анурия. В. Полиурия. С. Никтурия. D. Олигурия. Е. Поллакиурия.
12. Содержание аммиака в моче является важным показателем кислотно-щелочного состояния организма; количество аммиака повышается как при респираторном, так и метаболическом ацидозе. Это связано со стимуляцией при ацидозе синтеза в клетках эпителия почечных канальцев ферментов:
А. Глутаминазы. В. Цикла Кребса. | С. Карбоангидразы. D. АТФ-азы. | Е. Гиалуронидазы. |
13. Больной, 45 лет, жалуется на неутолимую жажду, потребление большого количества жидкости (до 5 л), выделение значительного количества мочи (до 6 л в сутки). Концентрация глюкозы в крови составляет 4,4 ммоль/л, уровень кетоновых тел не повышен. Моча неокрашена, удельный вес 1,002; сахар в моче не определяется. Дефицит какого гормона может привести к таким изменениям?
A. Глюкагона. B. Альдостерона. C. Инсулина. D. Вазопрессина.
14. При лабораторном исследовании ребёнка выявлено повышенное содержание в моче лейцина, валина, изолейцина и их кетопроизводных. Моча имеет характерный запах кленового сиропа. Недостаточностью какого фермента вызваны данные изменения?
А. Дегидрогеназы α-кетокислот. В. Аминотрансферазы. С. Глюкозо-6-фосфатазы. | D. Фосфофруктокиназы. Е. Фосфофруктомутазы. |
ПРАКТИЧЕСКАЯ РАБОТА
Дата публикования: 2015-07-22; Прочитано: 2321 | Нарушение авторского права страницы | Мы поможем в написании вашей работы!