Технология получения посевного материала в цехе чистой культуры

Приготовление посевного материала в зависимости от вида продуцента, его физиолого-биохимических особенностей состоит из нескольких после­довательных этапов:

исходная культура (в пробирке) выращивание на скошенной агари-

зованной среде (в пробирках) выращивание в колбах на качалке на

жидкой среде (одна- две стадии) выращивание в посевном аппарате

(инокуляторе - один или несколько) накопление культуры микроор­ганизмов в малом ферментаторе посевной материал

Первая стадия выращивания посевного материала осуществляется в за­водской лаборатории. Исходную культуру размножают на скошенной агаризованной среде в пробирке в стерильных условиях при оптимальных составе питательной среде и режиме выращивания (рН, температура, длительность). Выращенную культуру стерильно смывают водой с поверхности агаризованной среды в колбы Эрленмейера вместимостью 750 мл, содержащие 50-100 мл жидкой питательной среды. Колбы с культурой помещают на качал­ку, которая находится в термостатируемом помещении (28-30°С). Переме­шивание культуры, которая осуществляется встряхиванием качалки (120-240 об/мин), увеличивает скорость роста культуры благодаря интенсификации массообмена. Продолжительность выращивания культуры в колбах на ка­чалке составляет 18-36 часов. Наилучшие результаты дает культура, которая находится в стадии физиологической зрелости в конце логарифмической фа­зы роста.

На второй стадии выращивания посевного материала готовую культуру из колб стерильно переносят в посевной аппарат (инокулятор), в который предварительно вносят парафины и минеральные соли в определенных ко­личествах. Посевной аппарат оснащен мешалкой, аэрирующим устройством, а также контрольно-измерительной аппаратурой для регулирования темпе­ратуры, рН, уровня пены и т.д. Объем питательной среды в аппарате не дол­жен превышать 60% от общего объема. Важное значение имеет количество внесенного в аппарат посевного материала. При малом количестве посевного материала требуется более длительный период инокуляции. Поэтому в по­севной аппарат вносят посевного материала 10-12% от объема пита­тельной среды. Обычно процесс заканчивается за 12-14 часов.

Третья стадия культивирования посевного материала осуществляется в посевном аппарате объемом 3,2 м³. Для этого все содержимое малого ино-кулята перекачивается в аппарат большего объема, в котором находится простерилизованная питательная среда. Процесс выращивания длится 12-14 часов.

Четвертая стадия процесса осуществляется в аппарате объемом 50 м³. Перед приемом дрожжевой суспензии с предыдущей стадии в аппарате гото­вят питательную среду путем подачи парафина, растворов питательных солей и микроэлементов. Среду доводят до оптимальных значений рН и темпера­туры, перекачивают засевные дрожжи с предыдущей стадии и начинают процесс выращивания при непрерывной аэрации и перемешивании. Процесс накопления дрожжей длится 10-12 часов. Когда концентрация абсолютно су­хих дрожжей в среде составит 14-17 г/л, дрожжевую суспензию можно пода­вать в производственные ферментаторы. Полученный посевной материал подвергают тщательному микробиологическому и биохимическому контро­лю, так как от его активности и чистоты зависит дальнейший производст­венный цикл.