Гидролиз белков. Методы, условия, продукты гидролиза. Определение степени гидролиза. Использование гидролизатов в медицине

Гидролиз – расщепление пептидной связи при участии молекулы воды (вода отдает функциональные группы Н и ОН для восстановления пептидной связи).

Различают ферментативный, химический, полный и неполный гидролиз. Гидролиз протекает постепенно: белок – полипептид – олигопептид – дипептид – АМК. Его можно остановить на любой стадии, изменив оно из условий гиролиза.

Ферментативный гидролиз in vivo –пищеварение, для проведения его in vitro осн.усл являются: 1)набор очищенных кристаллических Ф, потому что Ф высоко специфичны; 2) t=37; 3)небольшое кол-во Ф по отношению к Б; 4) процесс длительный (неск.суток). Недостатки: зарастание микрофлорой и выделение токсических продуктов.

Химический гидролиз. Условия: 1)концентрированные щелочи и к-ты (25-30% 5-12н); 2) объем к-т, щелочи в 5-10 раз больше объема Б; 3) Время гиролиза от 10 до 96 ч; 4) t=100-110. Недостатки: при щел.гидролизе происходит рацетизация АМК, т.е. они переходят из L-ряда в D-ряд и живыми ор-мами не усваиваются; при кисл.гидролизе разрушается ряд АМК (триптофан, цистеин).

Оценка глубины гидролиза: 1.Качественные методы. Биуретовая р-ия (на пептидные связи), осадочные р-ии с ТХУ, НNO₃, сульфосалициловой кислотой; р-ия с нингидрином (положение свободных NH₂).

2. Количественные. Основаны на р-ии АМК с формальдегидом, на определении аминного азота – это азот, вход.в аминогруппы, наход.в α-положении.

В негидролизированном белке отношение аминного азота к общему составляет 1-10%, в неполном гидролизате – 10-75%, в полном – 70-90%.

Использование гиролизатов в меицине: 1)для изучения первичной структуры Б; 2)для парентерального питания; 3)в качестве кровезаменителя.