III фаза–превращение фибриногена в фибрин

Эта фаза протекает в 3 этапа. На первом этапе фибриноген под влиянием тромбина расщепляется на фибрин-мономер и на 2 молекулы фибринопептидов А и В.

На втором этапе происходит полимеризация фибрин-мономера. Этот процесс протекает при участии ионов Са²⁺, т.е. он не является ферментативным процессом. В результате образуется фибрин-полимер, в котором молекулы фибрин-мономера связаны непрочными водородными связями. Это гель. Однако он отличается плохими механическими свойствами и быстро растворяется плазмином и трипсином. Отсюда он и получил свое название – фибрин "S" (soluble), растворимый фибрин.

_{тромбин Са2+}

ФИБРИНОГЕН ФИБРИН-МОНОМЕР ФИБРИН-

^{+Фибринопептиды А и В}

_Ф.XIII

ПОЛИМЕР ФИБРИН “I”

или (фибрин “S”) (фибрин окончательный)

На третьем этапе из фибрин-полимера образуется окончательной фибрин, или нерастворимый фибрин "I" (insoluble). Этот процесс происходит с участием фибринстабилизирующего фактора – фактора ХIII плазмы. Он находится в плазме, в тромбоцитах, эритроцитах и тканях. Активируется он под влиянием тромбина. Фибриназа дополнительными пептидными связями укрепляет фибрин-полимер, делает его более прочным и устойчивым. Волокна фибрина "J" не растворяются фибринолизином. Процесс образования фибрина из фибриногена длится всего 2-5 секунд.

Образование фибрина завершает 3 стадию свертывания крови и коагуляционный гемостаз в целом. Образовавшийся фибриновый тромб называют еще кровяным, или красным (т.к. в его сгустках оседают эритроциты), и он способен закупорить надолго крупный сосуд.

Таким образом, наиболее сложной и длительной (5-10 мин) фазой коагуляции является фаза протромбиназообразования. Между тем на 2 и 3 фазы требуется только по 2-5 секунд.

Во время свертывания крови в пробирке также последовательно образуются протромбиназа, тромбин, фибрин. Этих веществ нет в циркулирующей крови здорового человека. Если же они появляются, это свидетельствует о начавшемся внутрисосудистом свертывании крови. Оно может явиться временной защитной реакцией организма, но может наблюдаться более длительное время при патологии. Повышение свертываемости крови - гиперкоагулемия часто заканчивается тромбозами, тромбоэмболией и ДВС-синдромом (диссеминированным, или распространенным внутрисосудистым свертыванием крови).

Наоборот, при медленном образовании протромбиназы, тромбина и фибрина снижается свертываемость крови, т.е. развивается гипокоагулемия. Гипокоагулемия может привести к кровотечениям.

Поэтому оценка скорости появления протромбиназы, тромбина и фибрина имеет большое клиническое значение для выяснения патогенеза кровоточивости и тромбоза, а также для терапевтической коррекции.

Скорость свертывания крови тем больше, чем лучше смачиваемость поверхности пробирки. В обычной сухой пробирке кровь свертывается за 5-7 минут, а в силиконированной – за 10-20 минут. Если же кровь прилить в пробирку, содержащую взвесь каолина, который обладает максимальной смачиваемой поверхностью, то кровь свернется за 1-2 минуты. Таким образом, степень контактной активации обусловлена активацией фактора XII.

Из сопоставления этих результатов ясно, что основное время в первой фазе занимает контактная активация. Поэтому для форсирования свертывания крови необходимо ускорить контактную активацию. Ускорением же 2 и 3 фаз гиперкоагулемию получить невозможно, ибо они протекают практически мгновенно, за 2-5 секунд.

При исследовании времени свертывания капиллярной, маточной и венозной крови было обнаружено, что капиллярная кровь свертывается в 2-3 раза, а маточная в 10 раз быстрее, чем венозная кровь. Это связано с тем, что капиллярная и особенно маточная кровь содержат в большом количестве тканевый тромбопластин, который превращается в тканевую протромбиназу гораздо быстрее, чем образуется кровяная протромбиназа.

Следовательно, основными причинами гиперкоагуляции являются ускорение контактной активации и поступление тканевого тромбопластина в кровеносное русло.

Гипокоагулемия (удлинение времени свертывания крови) может быть вызвана снижением концентрации факторов свертывания крови (при гемофилиях и при гипофибриногенемии), появлением циркулирующих антикоагулянтов. Так, гепарин парализует как контактную активацию и последующие фазы протромбинообразования, так и образование тканевой протромбиназы. И действительно, при введении гепарина резко удлиняется время свертывания крови.

Наличие антикоагулянтов в крови имеет очень большое значение: они ограничивают процесс образования фибрина, препятствуют его распространению от места повреждения стенки сосуда по сосудистому руслу. Среди циркулирующих антикоагулянтов важное значение имеют антитромбины.

Антитромбины по скорости их действия разделяются на две группы.

Быстродействующие антитромбины - антитромбины I и II, которые очень быстро инактивируют тромбин. Антитромбин I - это фибрин, обладающий свойствами адсорбировать тромбин и выводить его из реакции. Антитромбин II - глобулин, кофактор гепарина. В настоящее время идентифицирован с антитромбином III, т.е. не существует.

Медленнодействующие антитромбины - антитромбины III и IV, которые инактивируют тромбин медленно, но с постоянно нарастающей скоростью. Поэтому их называют как медленнодействующими, так и прогрессивными. Антитромбин III - гамма-глобулин, антитромбин IV - белок - ускоритель действия антитромбина III.

Позже были открыты антитромбины V и VI. Антитромбин V - патологические иммуноглобулины и парапротеины, ингибирущие гемокоагуляцию на различных стадиях и прежде всего фибринообразование. Антитромбин VI – продукты фибринолиза и фибриногенолиза, т.е. продукты расщепления фибрина и фибриногена плазмином. Они тормозят действие тромбина на фибриноген, препятствуют полимеризации фибрин-мономера.

После детального изучения свойств антитромбинов все антикоагулянты стали классифицировать по механизму образования в организме.

Первичные антикоагулянты синтезируются в организме как самостоятельные обособленные вещества и постоянно с определенной скоростью поступают в кровоток. Там они взаимодействуют с активными факторами коагуляции и нейтрализуют их. Первичные антикоагулянты не действуют на неактивные формы факторов свер­тывания крови /проферменты, прокоагулянты/. К первичным антикоагулянтам относятся: антитромбин III, гепарин, альфа₂-макроглобулин, контактный ингибитор, ингибитор комплемента-1, антикефалин (липидный ингибитор Токантиса), антипротромбиназы и др.

АНТИТРОМБИН III – гамма₂-глобулин. Мм=64000. 0бразуется в печени. Это мощный естественный антикоагулянт. На его долю приходится 70-90% всей антитромбиновой активности крови. АТ_III выполняет роль основного плазменного кофактора гепарина. Он активен только в присутствии гепарина. Гепарин превращает его из прогрессивного антикоагулянта в ингибитор немедленного, быстрого действия. Ингибиторная активность АТ_III в присутствии гепарина возрастает в 50-100 раз. АТ_III инактивирует тромбин, факторы ХII_а, XI_а, X_а, IX_а,VIIa, фибринолизин, калликреин. Вместе с тем, способность гепарина замедлять свертывание крови и инактивировать тромбин и другие факторы гемокоагуляции в значительной степени зависит от содержания в крови АТ_III: чем меньше его в плазме, тем менее эффективен гепарин. Для эффективного действия гепарина в крови должно быть не менее 50% АТ_III.

При врожденном или приобретенном дефиците АТ_III развиваются тромбозы и тромбоэмболии. Недостаточность АТ_III наследуется. При врожденном недостатке уже в раннем детском возрасте возникают тромбозы и тромбоэмболии. Приобретенный дефицит его встречается во второй половине беременности, во время родов, послеоперационном периоде. Снижается активность АТ_III при сахарном диабете, атеросклерозе, инфаркте миокарда, остром панкреатите, болезнях печени. Норадреналин и женские половые гормоны снижают содержание АТ_III. Увеличивается содержание его при холестазе и у женщин с климактерическими кровотечениями.

ГЕПАРИН - сульфатированный полисахарид с Мм = 12000. Синтезируется базофилами и в большом количестве тучными клетками. Его много в печени и легких. Еще в 1887 году И.П.Павлов обнаружил, что кровь, прошедшая малый круг, свертывается медленнее, чем кровь большого круга. Значит из легких поступают вещества, препятствующие свертыванию крови. А. А. Шмидт в 1890 году обнаружил в печени цитоглобин – вещество, которое тормозит свертывание. В 1916 году канадский студент Мак ЛИН выделил это вещество в чистом виде и назвал его гепарином. Содержание его в крови - 0,2 мг%.

Гепарин за счет сульфатированных группировок обладает сильными кислотными свойствами и мощным отрицательным зарядом. За счет этого заряда гепарин обладает большой реактивной способностью, взаимодействует с тромбоцитами и белками плазмы. С фибриногеном, плазмином и адреналином образует комплексы, обладающие антикоагулянтным и фибринолитическим действиями. В малых концентрациях ингибирует реакцию между факторами IX, VIII и 3, аутокаталическую активацию тромбина и действие фактора Х. В высоких концентрациях ингибирует коагуляцию во всех фазах, в том числе и образование фибрина под влиянием тромбина. Тормозит агрегацию тромбоцитов и выделение из них серотонина. Стимулирует фибринолиз, подавляет активность гиалуронидазы, понижает проницаемость сосудов, тормозит реакцию антиген-антитело, является противовоспалительным, противоболевым и главным средством лечения инфаркта.

Экзогенный /введенный в организм/ гепарин инактивируется в основном печени, но около 20% выделяется с мочой. Поэтому поcле назначения его больным с поражениями печени и почек необходимо следить за эффективностью лечения и уменьшать его дозы. Антагонистом гепарина является протамин.

a₂- макроглобулин. Это гликопротеид. Он медленно ингибирует тромбин, калликреин, плазмин и трипсин. На его долю приходится 3,5% обшей антитромбиновой активности крови.

Контактный ингибитор /анти-XI /.Это - глобулин - специфический ингибитор XI.

Ингибитор комплемента -I - ингибирует факторы XI, XII, калликреин. Активность контактного ингибитора и ингибитора комплемента играет су­щественную роль в предупреждении и ограничении тромбозов, особенно венозных.

a₂-антитрипсин инактивирует фактор XI, тромбин, плазмин.

Липидный ингибитор Токантиса /антикефалин/ представляет сфингомиелин, или фосфоинозин. Он ингибирует фактор 3 тромбоцитов, эритроцитин, кефалин. Нарушает как внешний, так и внутренний механизмы тромбообразования.

Вторичные физиологические антикоагулянты образуются из факторов свертывания и других белков в результате их протеолиза в процессе гемокоагуляции и фибринолиза. Это «отработанные» факторы свертывания крови и их фрагменты.

Антитромбин I - фибрин, адсорбирующий и превращающий тромбин в неактивную форму - метатромбин.

Метафактор V - Ас-глобулин, который после участия в коагуляции приобретает свойства анти-Х.

Фибринопептиды - продукты расщепления фибриногена тромбином.

ПДФ ( АТ_VI) - продукты расщепления фибриногена и фибрина плазмином. ПДФ тормозят полимеризацию фибрин-мономера, делают фибриноген недоступным воздействию тромбина, ингибируют фактор IХ, фибринолиз и агрегацию тромбоцитов.

Помимо физиологических /регулярных/ антикоагулянтов в крови при патологии могут образовываться мощные иммунные ингибиторы свертывания крови, являющиеся специфическими антителами против того или иного фактора. Такие антитела могут вырабатываться против любых факторов свертывания крови, но чаще всего в клинике встречаются ингибиторы факторов VIII и IX.

Наконец, при аутоиммунных процессах и при парапротеинемии в крови могут накапливаться патологические белки, которые ингибируют либо тромбин /АТ_V /, либо факторы X_а, II_a, V_a.Эти парапротеины часто блокируют адгезивно-агрегационную функцию тромбоцитов и одновременно повышают вязкость крови, вызывая расстройства микроциркуляции.

Основное назначение появления вторичных антикоагулянтов – обеспечение самоограничения свертывания крови. Благодаря этому процесс свертывания крови протекает локально, а не приводит к массивному внутрисосудистому свертыванию.

Особенно резко возрастает концентрация антикоагулянтов при стрессе, когда развивается гиперкоагулемия. Этим самым предупреждается внутрисосудистое свертывание крови.

ПОСЛЕФАЗА /посткоагуляционная фаза/

После стабилизации фибрина, который вместе с форменными элементами образует вторичный красный тромб, начинается послефаза. В посткоагуляционную фазу протекает два параллельных процесса: ретракция и фибринолиз. Они обеспечивают образование гемостатически полноценного окончательного вторичного тромба.

Благодаря спонтанному фибринолизу фибриновая сеть первичного тромба частично растворяется. Часть форменных элементов освобождается от фибрина и выпадает в осадок. По % осевших форменных элементов и судят о спонтанной фибринолитической активности крови. В норме у здоровых людей фибринолитическая активность равна 15-25%.

Одновременно со спонтанным фибринолизом сгусток ретрагирует. Ретракция происходит за счет тромбостенина тромбоцитов. Он освобождается из тромбоцитов при их склеивании и разрушении в результате вязкого метаморфоза. В ходе ретракции сгусток уменьшается в 2-4 раза. Из него выделяется сыворотка - это 60-75% жидкости сгустка. В выделившейся сыворотке отсутствуют факторы фибриногенового ряда: I, V, VIII, VIII.

Физиологический спонтанный фибринолиз и ретракция способствуют уплотнению тромба и выполнению им гемостатической функиии. Гемостатически полноценный тромб прочно удерживает края поврежденных сосудов, непроницаем для крови и даже после восстановления артериального и венозного давления хорошо противостоит спонтанному фибринолизу.