Работа 1. Определение осмотической резистентности эритроцитов

Эритроциты характеризуются различной устойчивостью к повреждающим факторам. Более высокую осмотическую стойкость имеют молодые формы эритроцитов, старые и некоторые патологические формы эритроцитов менее устойчивы к осмотическому повреждению. В связи с этим определение этого показателя имеет диагностическое значение. Так, необходимость оценки осмотической стойкости возникают при выявлении некоторых анемий гемолитического характера. При наследственной микросфероцитарной гемолитической анемии она уменьшается (минимальная - 0,6-0,7% NaCl, а максимальная - 0,3-0,25% NaCl). Устойчивость эритроцитов можно оценить количественно с помощью гипотонических растворов NaCl.

Ход работы. Для точного определения этого показателя применяют растворы хлорида натрия, различающиеся по концентрации на 0,02% в последовательном ряду от 0,60 до 0,24. Используется также более упрощенный способ определения осмотической резистентности эритроцитов. В пробирки одинакового размера наливают по 5 мл растворов хлорида натрия: изотонического (0,85-0,9%) и гипотонических (0,7%, 0,45%, 0,3%). В пятую пробирку наливают 5 мл дистиллированной воды. Затем добавляют во все пробирки по 0,3 мл взвеси эритроцитов, тщательно перемешивают и ставят штатив на 40-60 мин. После этого времени по степени прозрачности жидкости в пробирках определяют, где произошел гемолиз и в какой мере. При полном гемолизе жидкость прозрачна и относительно ярко окрашена (лаковая кровь). При частичном гемолизе раствор окрашен слабее и в нижней части пробирки жидкость мутная. При отсутствии гемолиза жидкость окрашена слабо, мутная, за исключением верхнего ободка. На основании этого определяют (в % концентрации NaCl) минимальную устойчивость эритроцитов по появлению признаков гемолиза и максимальную устойчивость по возникновению полного гемолиза.

Рекомендации к оформлению работы. В результатах укажите показатели минимальной и максимальной осмотической резистентности эритроцитов, в анализе сравните их с нормальными показателями.

Работа 2. Определение скорости оседания эритроцитов (СОЭ)

Кровь при движении представляет собой устойчивую суспензию. Если же стабилизированную цитратом натрия кровь отстаивать в течение часа, то она разделяется на верхний светлый слой плазмы и нижний красный слой эритроцитов. Высота столбика плазмы (в мм/ч) определяет величину СОЭ. Наиболее распространенным способом определения СОЭ является способ Панченкова. Сам прибор Панченкова представляет собой штатив, в котором помещаются одна или несколько капилляров с внутренним диаметром в 1мм. Капилляры градуированы в мм от 0 (верхняя метка) до 100. Кроме того, на уровне метки 0 имеется вторая - К (кровь), а на уровне 50 мм - Р (реактив).

Ход работы. Капилляр промывает 5% раствором цитрата натрия для предупреждения свертывания крови. Затем набирают в него цитрат натрия до метки Р и выдувают его на часовое стекло. Затем в тот же капилляр дважды набирают кровь до метки К, смешивают ее с цитратом натрия на часовом стекле. Полученную таким образом смесь цитрата натрия с кровью в соотношении 1:4 набирают в капилляр до 0 и ставят в штатив. Через час определяют высоту (в мм) образовавшегося верхнего столбика плазмы в капилляре. Его величина и является мерой СОЭ.

Рекомендации к оформлению работы. В результатах укажите полученный индивидуальный показатель и пределы его колебаний у юношей и девушек подгруппы. В анализе сравните их с нормальными показателями.