Методы микробиологического исследования

1. Микроскопический

2. Бактериологический

Алгоритм микробиологического исследования по стафилококку слизистого отделяемого носоглотки:

1. Забор материала (отделяемого из зева и носа) тампоном.

2. 1 день — микроскопия с тампона, окраска по Граму. При наличии Гр+ кокков в виде гроздьев дается ответ: наличие стафилококка.

3. Посев тампоном по секторам на ЖСА, МСА, КА — 37 градусов Цельсия 24 часа.

4. 2 день — отбор колоний с радужной зоны (ЖСА) и зоной гемолиза (КА) и пересев их на скошенный МПА для выделения чистой культуры — 37 градусов Цельсия 24 часа. Чашки с МСА оставляют при комнатной температуре на 2-3 дня для выявления пигмента.

5. 3 день — просмотр чистой культуры, проверка чистоты: мазок, окраска по Граму. С чистой культурой для дифференциации золотистого стафилококка от эпидермального сапрофитного ставят тесты.

РПК-реакция плазмокоагуляции. Разведенную в два раза цитратную плазму разливают в две пробирки по 0,4 мл. В первую пробирку петлей вносят чистую культуру, другая пробирка служит контролем. Помещают в термостат при 37 градусах Цельсия на 24 часа. При положительной реакции плазма свертывается и не выливается из перевернутой пробирки. В контроле плазма жидкая.

Ферментация маннита. В анаэробных условиях — посев уколом в столбик с маннитом, с последующей заливкой вазелиновым маслом. Выдержать в термостате при 37 градусах Цельсия 24 часа.

Чувствительность к новобиоцину — только сапрофитный стафилококк устойчив к действию новобиоцина. На питательный агар наносится новобиоцин и засевается чистой культурой. Выдерживается в термостате при 37 градусах Цельсия 24 часа.

6. 4 день — учет результатов.

Стафилококки	Коагулаза	Лецитиназа	Гемолиз	Маннит	Новобицин
Золотистый	+	+	+	+	Неустойчив
Эпидермальный	-	-	-	-	Неустойчив
Сапрофитный	-	-	-	-	Устойчив

Выделен золотистый стафилококк.

7. Фаготипирование (посев чистой культуры газоном и типируют 36 фагами при 37 градусах Цельсия 24 часа. Определение чувствительности к антибиотикам (посев газоном + диски с антибиотиками) при 37 градусах Цельсия 24 часа.

8. 5 день — учет фаготипирования и чувствительности к антибиотикам. Окончательный ответ: выделен S.aeroginosa, фаготип 13. Чувствителен к эритромицину, ванкомицину.