Разлив сред

1. Агаровых сред в чашки Петри:

а) расплавить на водяной бане, остудить до 45-50ºС с МПА

б) поставить чашку крышкой вверх

в) сосуд до средой взять в правую руку, держа его у огня

г) левой рукой вынуть пробку, зажав ее мизинцем и ладонью

д) обжечь горлышко бутылки со средой и двумя пальцами левой руки слегка приоткрыть крышку

е) ввести под нее горлышко бутыли, не касаясь им края чашки и налить 15-20 мл. среды.

Если посев проводят в день разлива среды, то её необходимо подсушить в термостате 20-30 минут в разобранном виде, открыто стороной вниз. Если посев проводят на следующий день, то чашки не подсушивая заворачивают в ту же бумагу, в которой их стерилизовали и помещают в холодильник.

2. Агаровых среда в пробирки:

а) взять сосуд с расплавленной и остуженной до 45ºС средой

б) левой рукой взять пробирку

в) правой рукой извлечь пробку из пробирки, а левой рукой из сосуда со средой, зажав ее мизинцем и ладонью

г) обжечь края пробирки и сосуда со средой, внести в пробирку 3-5 мл среды

д) вновь обжечь горлышки емкостей, закрыть из пробками

Агаровые среды могут застывать в пробирках в виде:

1. Скошенного столбика

2. Комбинированного столбика

3. Столбика

Для получения скошенного и комбинированного столбика, пробирки с расплавленной агаровой массой укладывают в наклонном положении на специальную подставку, чтобы среда не заходила на 2/3 пробирки, не смачивала пробку. После застывания среды, пробирки ставят вертикально в штатив, дают стечь конденсату вниз. Пользоваться средой без конденсата нельзя. Ее следует снова растопить на водяной бане и скосить.

Наименование	Среда Эндо	Среда Левина-ЭМС	Среда Плоскирева
Компоненты среды: 1. Питательная основа 2. Углевод 3. Индикатор	1. МПА 2. Лактоза 3. Спиртовой раствор основного фуксина, обесцвеченный раствором сульфита натрия	1. МПА 2. Лактоза 3. Водные растворы метиленовой сини и эозина	1. МПА 2. Натриевые соли жел.к-т 3. Лактоза 4. Натрий лимонно-кислый 5. Нейтральрот 6. Бриллиантовый зеленый
Принцип действия	Микроорганизмы, расщепляющие лактозу до кислоты, изменяют pH среды в кислую сторону. Связанный фуксин раствором сульфата натрия освобождается и окрашивает колонии и среду вокруг в красно-малиновый цвет. Колонии микроорганизмов, не расщепляющих лактозу, остаются бесцветными.	Микроорганизмы расщепляющие лактозу до кислоты формируют колонии темно-синего цвета,а не разлагающие лактозу образуют бесцветные колонии.	Микроорганизмы расщепляющие лактозу до кислоты формируют колонии оранжевого цвета, а не разлагающие лактозу — бесцветные.
Практическое применение	Для выделения чистых культур энтеробактерий и дифференциации лактозоотрицательных (как правило возбудителей кишечных инфекций) от лактозоположительных (например кишечные палочки)
Внешний вид среды до посева	Среда плотная, слабо розового цвета. Разливается в чашки Петри. Готовится из сухой баночной среды.	Среда плотная, темно-лилового цвета, разливается в чашки Петри. Готовится из сухой баночной среды	Среда плотная, красно-оранжевого цвета, разливается в чашки Петри. Готовится из сухой баночной среды.

Мясо-пептонный агар

Бесцветные – патогенные бактерии, окрашенные – сапрофиты.

Кровяной агар

Патогенные – образуют зоны гемолиза.

Желточно-солевой агар (ЖСА)

Сапрофиты – цветные, патогенные – бесцветные с зоной помутнения перламутрового оттенка.

Среда ЭНДО

Сапрофиты – малиновые, патогенные – бесцветные

Среда Левина ЭМС

Сапрофиты – синие, патогенные – бесцветные

Среда Плоскирева

Сапрофиты – оранжевые, патогенные – бесцветные.