Приготовление питательных сред

Исходным сырьем для приготовления натуральных питательных сред служат продукты животного и растительного происхождения: мясо, молоко, яйца, картофель, костная и рыбья мука, а также сгустки крови, плацента, казеин. Исходные продукты варят, получая бульон (мясо-пептонный бульон). Полученный бульон осветляют, фильтруют, определяют pH с помощью индикаторной бумаги и pH-метра. Доводят до нужной pH добавляя щелочь или кислоту. Бульон разливают в колбы и стерилизуют в автоклаве при 1 атм. 20 минут.

Питательный бульон служит основой для приготовления различных сред. Для получения плотных агаровых питательных сред к питательному бульону добавляют 2% агара, для полужидких — 0,5% агара.

Агар — это продукт морских водорослей, обладающий свойством плавится при температуре 80-85ºС и затвердевать при 40ºС. При добавлении к бульону агар превращает его в плотную среду (при комнатной температуре до 40ºС). Плотные среды, содержащие агар, называют агаровыми.

Безагаровые плотные среды — свернутая сыворотка, свернутый яичный белок сами по себе являются плотными. Свертывание белков крови, яйца проводят в свертывателе Коха при температуре 85ºС в течение 3 дней по 1 часу. В настоящее время в микробиологической практике чаще используют готовые синтетические среды в сухих порошках, которые перед использованием разводят холодной водой по инструкции, кипятят и разливают по чашкам и пробиркам.