Главная Случайная страница Контакты | Мы поможем в написании вашей работы! | ||
|
Лабораторная работа (количественное определение креатина в моче методом А.Д.Брауна)
В три пробирки внести по 0.2 мл 37% раствора соляной кислоты, в пробирки 1-ю и 2-ю добавить по 0.2 мл исследуемой мочи, разбавленной в 5 раз дистиллированной водой. Смесь в пробирке 2-й нагревать 3 мин на кипящей водяной бане, затем охладить. Во все три пробирки внести по 0.6 мл пикриновой кислоты и по 1 мл едкого натра (пикриновая кислота насыщенная, едкий натр 12.5%). Инкубировать 10 мин при комнатной температуре, добавить по 6 мл воды, смешать.
Раствор колориметрировать против контроля (пробирки 3-й) в кювете с рабочим слоем 10 мм (фильтр зеленый). Ниже в таблице приведены данные для построения калибровочной кривой, полученные в опытах со стандартным раствором креатинина.
Концентрация стандартных растворов креатинина, мг/мл | Оптическая плотность, экстинкции |
0.08 | 0.05 |
1.0 | 0.10 |
1.2 | 0.20 |
1.4 | 0.30 |
1.6 | 0.40 |
1.8 | 0.50 |
2.0 | 0.6 |
На основании этих данных построить график зависимости оптической плотности от концентрации растворов креатинина и с помощью графика определите содержание креатинина в исследуемой пробе:
пробирка 1-я - содержание креатинина;
пробирка 2-я – содержание креатинина + креатина.
По разнице между пробами 1-й и 2-й можно рассчитать содержание креатина.
Используя учебник, выполнить следующее:
1. Нарисовать черно-белое схематическое изображение мышечной клетки так, чтобы различались фибриллы с чередованием темных и светлых участков (дисков), линия Z. Обозначить на рисунке саркомер, А- и I-диски, Н-зону и линию Z.
2. Нарисовать схему поперечного среза мышечного волокна таким образом, чтобы различались толстые и тонкие филаменты.
3. Какой белок образует тонкие филаменты?
4. Как уложены молекулы миозина в толстом филаменте? Нарисовать схему.
5. Какие белки образуют тонкие филаменты? Нарисовать схему, в которой можно различить G- и F-актин, а также актиновую нить и тропомиозин.
6. Назвать субъединицы тропонина и их функции.
7. Нарисовать схему, включающую саркомер покоящейся мышцы и сарко-
мер сокращенной мышцы и описать вербально различия между ними.
8. Перечислить последовательность событий, вызываемых приходом потен-
циала действия на концевую пластинку двигательного нерва.
9. Почему рост концентрации кальция в цитозоле мышечной клетки вызы-
вает движение молекулы тропомиозина по желобку тонкого филамента?
10. Кратко изложить гипотезу, называемую "модель весельной лодки".
11. От чего зависит сила сокращения мышцы?
12. Какой фермент и каким путем обеспечивает переход сокращенной мыш-
цы в состояние покоя?
13. Потребность мышцы в АТФ при сокращении может возрасти примерно в 1000 раз (запаса АТФ хватит на О,5 с работы). В этом случае потребление кислорода отстает от потребности в АТФ и ее поставщиком становится гликолиз. Какой продукт является аллостерическим активатором гликолиза, через какой фермент реализуется его действие?
14. В какой реакции образуется АМФ, каким ферментом катализируется этот процесс?
15. Назвать фермент, катализирующий образование креатинфосфата и обязательный соучастник процесса.
16. Как изменяется выделение креатина и креатинина при заболеваниях мышц?
ЗАНЯТИЕ 34 (биохимия крови)
Цель: изучить важнейшие функции крови, которые определяют её участие в гомеостазе организма, изучить белки плазмы крови, их значение для лабораторной диагностики, небелковые органические и неорганические компоненты плазмы крови, эритроциты и другие клетки крови – их роль в обменных процессах, кислотно-щелочное состояние крови и его изменения.
Студент должен знать:
1. Важнейшие функции крови.
2. Электролитный состава крови и важнейшие метаболиты, определяющиеся в диагностических целях.
3. Белки плазмы крови, их разделение, функции отдельных фракций.
4. Ферменты плазмы (сыворотки) крови, роль определения этих ферментов в диагностике.
5. Форменные элементы крови, особенности метаболизма в эритроцитах и тромбоцитах.
6. Буферные системы крови.
Студент должен уметь:
1. Отделить жидкую часть крови (получить плазму крови).
2. Объяснить принцип электрофоретического метода разделения белков плазмы (сыворотки) крови.
3. Нарисовать схему электрофореграммы белков плазмы крови.
Студент должен иметь представление:
1. О наиболее часто встречающихся патологических состояниях, сопровождающихся изменением содержания белка в плазме крови и протеинограммы плазмы.
2. О причинах врожденных и приобретенных анемий.
Сведения из базовых дисциплин, необходимые для изучения темы:
1. Строение и синтез гемоглобина.
2. Механизмы и значение свободнорадикальных процессов.
3. Виды и функции липопротеинов.
4. Классификация белков.
5. Метаболиты углеводного, белкового и липидного обменов, обнаруживаемые в крови.
6. О биологической роли пентозофосфатного пути превращения глюкозы.
Дата публикования: 2015-02-20; Прочитано: 339 | Нарушение авторского права страницы | Мы поможем в написании вашей работы!