Диагностика. Амеб можно обнаружить в нативных или окрашенных мазках, однако уточнить диагноз амебиаза можно только определив паразита как E.invadens (что делается на

Амеб можно обнаружить в нативных или окрашенных мазках, однако уточнить диагноз амебиаза можно только определив паразита как E.invadens (что делается на основании морфологии окрашенной цисты или культивации амеб на специальных средах), либо при гистологическом исследовании биоптата кишечной стенки. Ретроспективно можно подтвердить амебиаз, проведя диагностическую терапию. Для нативного мазка берут небольшую навеску кала из клоаки, а еще лучше – глубокий мазок из ободочной кишки, размешивают материал в теплом изотоническом растворе и затем исследуют раздавленную каплю. Правильно определить цисты при таком способе исследования не всегда удается. У азиатских видов ящериц, змей и черепах одновременно может встречаться несколько видов амеб (Bonner, et al, 2001). У животных с анорексией вообще могут выявляться только цисты. Лучше всего пронаблюдать превращение трофозоита в цисту, что правда занимает 20-60 минут. Вообще, определение амеб в нативном мазке результативно, только если выделяется много живых трофозоитов. При периодическом выделении цист требуется до 5-10 повторных анализов с интервалом в 3 дня. Лучший метод – культивация, центрифугирование и исследование осадка. Для культивации амеб используют так называемые двухфазные среды. Твердую фазу на основе агара, вареного желтка или сыворотки покрывают жидкой средой. Все модификации, применяемые для культивации E.invadens от рептилий, выполнены на основе двухфазных или монофазных сред из медицинской лабораторной практики (Nelson, 1947; Frank, 1966). Массовое размножение амеб на питательной среде наблюдается через 3-4 дня. Трофозоиты имеют характерную морфологию и размер 10-20 мкм. Цисты обычно сферические и могут иметь разное количество ядер (но не более 4), что может характеризовать разные виды или просто разные стадии формирования цисты.

Окраску нативного мазка проводят также раствором Люголя, смешав свежую навеску кала с несколькими каплями водного раствора. Метод позволяет выявить цисты, которые окрашиваются в бурый или коричневый цвет. При таком способе легче проводить подсчет ядер в цисте. Пригодны и методы, применяющиеся в гуманной медицине: фекалии фиксируют в поливиниловом спирте, затем высушенные и фиксированные мазки окрашивают трихромом или железным гематоксилином. ELISA и IFA для диагностики амебиаза рептилий пока не разработаны. Франк и Зигмунд (Frank, Sigmund, 1976) использовали метод прямой обработки сыворотки крови змей иммунофлуоресцентными антителами (FITC), считая позитивным титр 1:16. Непрямой метод позволял исследовать ткани рептилий, зафиксированных в формалине несколько лет назад, но так и не получил широкого распространения в клинической практике. Предлагали также проводить электрофорез сыворотки крови (Frank, et al, 1972). Изменения на форетограмме были наиболее отчетливы у животных с поражениями печени. Для гистологического исследования берут фрагменты ободочной, подвздошной кишки и печени, возможна также прижизненная биопсия ободочной кишки в области язв.