 |
Главная Случайная страница Контакты | Мы поможем в написании вашей работы! | |
Обнаружение барбитуратов методом хроматографии в тонком слое сорбента
|
|
Этот метод позволяет не только обнаружить отдельные барбитураты, но и отличить их друг от друга.
При проведении данного исследования предварительно готовятся хроматографические пластинки с закрепленным слоем силикагеляКСКили пластинки «Силуфол» УФ-254 и хроматографическая камера. На линии старта хроматографической пластинки с помощью капилляра наносят в виде точки спиртовые растворы (I мг/мл) барбитала, фенобарбитала, этаминала-натрия, барбамила и исследуемой пробы В качестве системы растворителей используют системы: система-1: ацетон хлороформ (I: 9 ). система-2: хлороформ - н-бутанол - 25% аммиак (70:40:5). Пластинку подсушивают при комнатной температуре или в токе теплого воздуха и опрыскивают вначале 0.025% раствором дифенилкарбазона, затем раствором 5% сульфата ртути (11), при этом пятна барбитурата на пластинке приобретают синее или красно-фиолетовое окрашивание. Пятна отмечают острием иглы и вычисляют значение Rf для каждой зоны нанесенных препаратов и исследуемой пробы.
Этими значениями пользуются для идентификации барбитурата в исследуемой пробе.
4.5. Проведение ТСХ-скрининга веществ кислотного характера
Эфирный экстракт из кислого раствора выпаривают досуха под током воздуха при температуре 40-50°С. Остаток с помощью хлороформа количественно наносят в виде полосы на стартовую линию пластинки с тонким слоем силикагеля КСК. Для хроматографирования используют силикагель марки КСК с размером частиц не более 0,12 мм. Пластинки готовят с помощью аппликатора или вручную из расчета 3.0 силикагеля, 0.2 г гипса и 7,5 м 0,025 М раствора воды на одну пластинку размером 9x12 см. Активируют пластинки в течение 30 минут при 120°С. По краям стартовой линии наносят хлороформный раствор смеси кислотных форм дифенина и тиопентала и хроматографируют в системе ацетон - н-гексан - диэтиламин ( 10:10:1). После высыхания пластинку обрабатывают раствором сульфата ртути до увлажнения. Вещества кислотного характера проявляются в виде полос (метчики в виде пятен) белого цвета на белом фоне (за исключением этосукцимида и мепробамата). Устанавливают, какой хроматографической зоне относятся искомые вещества. Визуально можно обнаружить 3 хроматографические зоны:
Вещества первой хроматографической группы (пятна расположены между линией старта и линией миграции пятен дифенина). К данной, группе относятся: ацетилсалициловая, бензойная и салициловая кислоты, бутадион, бензонал, фенобарбитал.
Вещества второй хроматографической группы (пятна расположеный между линией миграции дифенина и тиопентала). К ним относятся: дифенин. барбитал, барбамил, этаминал.
Вещества третьей хроматографической группы (пятна расположены между линией миграции тиопентала и фронта растворителей). К ним относятся: тиопентал, пуфемид, этосукцимид, ноксирон, мепробамат.
Участок силикагеля из соответствующей зоны, содержащий исследуемое вещество, количественно переносят во флакон вместимостью 20 мл, добавляют 1 мл насыщенного раствора хлорида натрия, 10 мл хлороформа, встряхивают и центрифугируют. Хлороформную фазу фильтруют через сухой бумажный фильтр и выпаривают при 50-60°С на водяной бане. Операцию элюирования повторяют еще один раз, используя 5 мл хлороформа. Дальнейшее исследование объдиненного хлороформного извлечения проводится на основе полученного результата ТСХ скрининга.
тиопентал
дифенин
Рис. 1 Хроматограмма при исследовании веществ кислотного характера (ГСХ-скрининг).
Таблица
РАСПРЕДЕЛЕНИЕ ВЕЩЕСТВ КИСЛОТНОГО ХАРАКТЕРА ПО ХРОМАТОГРАФИЧЕСКИМ ГРУППАМ
Дата публикования: 2015-01-23; Прочитано: 903 | Нарушение авторского права страницы | Мы поможем в написании вашей работы!
