Культивування в суспензії

Дуже трудомісткий метод.

Загальні принципи:

- розмножуються в суспензії тільки клітинні лінії;

- не треба прикріплювати до субстрату, клітини можуть зависати;

- клітини можуть утворювати моношар.

Була визначена кореляція між плоїдістю клітин і здатністю їх росту в суспензійній культурі.

Суспензійне культивування проводять у біореакторі з нержавіючої сталі об’ємом декілька сотень – тисяч літрів. Співвідношення між довжиною і шириною 1:1 ÷ 1:3.

Лімітуючі фактори:

1) перемішування. Для перемішування використовують реактори з механічними мішалками, з пневматичним перемішуванням, вібромішалками. Найбільш ефективний – аерліфт – газова суміш під тиском; аерліфт виконує дві функції: перемішування і забезпечення киснем.

2) аерація. Забезпечення киснем відбувається:

а) пропусканням газу через поживне середовище – барботування;

б) пропускання газу через поверхню поживного середовища при надлишковому тискові;

в) насичення киснем суспензії - проточне культивування;

г) насичення киснем поживного середовища шляхом дифузії через напівпроникні мембрани.

а) – промислове; б) – лабораторне культивування; в), г) – додаткові способи.

3) спінювання. Піногасники не повинні бути токсичними для клітин.

Найчастіше універсальний – водна емульсія поліметилсилоксан, розведення 1:10000.

Використовують специфічні піно руйнівні пристрії спеціальних конструкцій.