Количественное определение растворимых белков

Содержание водо- и солерастворимых белков определяют колориметрическим методом с биуретовым реактивом. Метод основан на определении интенсивности окраски, возникающей в результате взаимодействия белков с ионами меди в щелочном растворе. При этом раствор белка окрашивается в сине–фиолетовый цвет.

Для проведения реакции 1 мл исследуемого раствора, содержащего (1–10) мг белка, смешивают с 4 мл биуретового реактива, оставляют на 30 минут при комнатной температуре в темноте шкафу. По истечению времени определяют оптическую плотность при длине волны 540 нм против воды.

Расчет белка ведут по формуле:

где, С – количество белка, найденное по калибровочному графику, мг/мл;

V – объем разведения, мл

П – навеска, г

1000 – перевод мг в г