Тест клеточной антигенной стимуляции базофилов - CAST

В случае IgE-опосредованных аллергических реакций пусковой механизм начинается со связывания аллергена со специфическими молекулами IgE на поверхности базофилов или тучных клеток. Эти молекулы IgE в свою очередь связываются с высокоаффинными рецепторами к IgE, так называемыми Fc eRI, в результате активизируется цепь внутриклеточных ферментативных реакций, приводящих к дегрануляции и выбросу из гранул гистамина и гепарина, а также к активации синтеза и высвобождения сульфолейкотриенов LTC_4, LTD₄ и LTE₄, играющих важную роль при развитии аллергических реакций. Сульфолейкотриены LTC_4, LTD₄ и LTE₄ являются продуктами распада арахидоновой кислоты, трансформированной 5-липогеназой и глютамин-С-трансферазой. Ранее они носили общее название «медленно реагирующие субстанции анафилаксии». Синтез их в IgE-зависимых реакциях стимулируется ИЛ-3, ИЛ-5 или GM-CSF. Сульфолейкотриены синтезируются такими клетками, как базофилы, тучные клетки, макрофаги, эозинофилы и почечные мезангиальные клетки.

В ходе активации клеток внутриклеточные компоненты лизосом, содержащие трансмембранный протеин CD63, прилипают к клеточной мембране и таким образом экспрессируют его на внешней поверхности цитоплазматической мембраны.

Тест клеточной антигенной стимуляции (CAST-тест) – это провокационный тест in vitro, имитирующий развитие IgE-зависимой аллергической реакции в организме человека. Принцип метода заключается в следующем: после добавления аллергена, например лекарственного препарата, к суспензии лейкоцитов больного, сенсибилизированного к нему, на базофилах усиливается экспрессия CD63-рецепторов и происходит выброс сульфолейкотриенов. Уровень экспрессии CD63-рецепторов на клетках определяют с помощью проточной цитометрии, а определение в надосадочной жидкости уровня сульфолейкотриенов – с помощью иммуноферментного анализа. Метод имеет 100% специфичность и существенно дополняет определение IgE – антител. Использование CAST-теста позволяет избежать применения опасных для жизни провокационных тестов и не несет никакого риска для пациента. CAST-тест нашел применение при диагностике лекарственной аллергии на антибиотики, анальгетики, анестетики, миорелаксанты и др., а также при аллергии на укусы насекомых (пчел, ос, тараканов, блох), ингаляционные аллергены, пищевые добавки (консерванты, красители) и профессиональные аллергены (латекс, хлорамин, формальдегид и др.).