Проточная цитофлуорометрия

В основе метода проточной цитометрии лежит измерение оптических свойств клеток. Клетки по одиночке вводятся в ламинарный поток в проточной кварцевой кювете, где они пересекают сфокусированный световой пучок, не касаясь стенок кюветы. Источником света могут быть различные лазеры, ультрафиолетовая лампа или их комбинация. Свет определенной длины волны возбуждает молекулы флюорохрома, связанного с различными клеточными компонентами за счет моноклональных антител. Свет, испускаемый флюорохромом, собирают с помощью системы линз и зеркал и преобразуют в электрические импульсы фотоумножительным устройством. Далее информация обрабатывается в цифровом режиме и отображается на гистограммах. Значительным преимуществом проточной цитометрии является возможность одновременного определения нескольких CD-маркеров, что позволяет более тонко идентифицировать различные субпопуляции лимфоцитов. Кроме этого, методом проточной цитометрии можно исследовать клеточный метаболизм, поглотительную, бактерицидную и фунгицидную активность фагоцитирующих клеток, продукцию ими активных форм кислорода, функциональной активности естественных киллерных клеток, митотический цикл клеток, проводить анализ пролиферативного статуса клеток, исследование экспрессии цитокинов, определение маркеров апоптоза, кинетику ферментативных реакций, определять концентрацию различных антигенов в биологических жидкостях. Методика работы на проточных цитометрах представлена в материалах фирм-производителей этих высокотехнологичных автоматов («Coulter», «Becton Deckinson», «Dako» и др.)