Получение препарата печени для экстракции гликогена

Через сутки от начала эксперимента крыс забивают, быстро извлекают печень, каждую из них делят на две части. Одна часть печени голодной и сытой крысы помещается в холодный физ. р-р для использования её в качестве источника активного фермента – гликогенфосфорилазы. Другая часть печени обеих крыс измельчается тонкими пластиками и каждая помещается в отдельный стаканчик с кипящим физ. р-ром на 5 минут для инактивации ферментов.

Оба этапа проводят лаборанты или студенты (по желанию) в виварии и операционном блоке кафедры.

Последующие этапы эксперимента проводятся на практическом занятии в учебных лабораторных комнатах группами студентов по 4 человека, из них двое выполняют работу № 1, c пункта 2 – получение экстрактов гликогена. Другие двое работу № 2.см ниже.

3.Получение экстрактов гликогена.

1) Навески печени голодного и сытого животного растереть в двух ступках с 3 мл 3% раствора ТХУ кислоты до гомогенного состояния.

2) К полученным экстрактам добавить по 4 мл Н₂О, всё перемешать и профильтровать в две промаркированные пробирки через смоченные водой фильтры.

3) В полученных фильтратах обнаружить наличие гликогена (табл. 1)

Таблица 1. Состав реакционных смесей для качественного определения гликогена

Сравнить окраску и сделать вывод о содержании гликогена в печени голодного и сытого животного, объяснить полученный результат.