Характеристика возбудителей

Таксономия. Возбудители газовой гангрены относятся к семейству Clostridiaceae, роду Clostridium (от греч. kloster - «веретено»). Они образуют споры овальной или округлой формы, которые превосходят в диаметре поперечник бактериальной клетки, что придает им форму веретена. Клостридии дифференцируют и идентифицируют на основании их морфологических, культуральных, биохимических и токсигенных свойств. Споры длительно сохраняются в окружающей среде, что способствует широкому распространению этих условно патогенных микроорганизмов. Ведущую роль в возникновении газовой гангрены (70-80% случаев) играет C. perfringens, что означает «прорывающий», «разламывающий», так как этот возбудитель обладает мощной ферментативной активностью.

Морфология и тинкториальные свойства. C. perfringens - грамположительные палочки, размеры которых варьируют. C. perfringens неподвижна, образует капсулу, особенно в биологических жидкостях и тканях. Споры у данного микроорганизма расположены центрально или субтерминально, что придает бактериям веретенообразную или булавовидную форму.

показано 69 из 95

с

Культивирование и биохимические свойства. По типу дыхания клостридии относятся к анаэробам. У них отсутствуют цитохромы и цитохромоксидазы, а также каталаза и пероксидаза. Для обеспечения анаэробиоза при их культивировании применяют анаэростаты, анаэробные камеры и газогенераторные пакеты. Клостридии культивируются при температуре 37 °C и рН = 7,0-7,4. C. perfringens имеет наиболее высокую скорость роста и размножения. Данный микроорганизм обладает выраженными сахаролитическими и протеолитическими свойствами. Уже через 1-3 ч C. perfringens на жидких питательных средах (среде Кита-Тароци, тиогликолевой среде) вызывают диффузное помутнение среды и бурное газообразование. На плотных агаризованных средах через 24-36 ч образуются как S- (гладкие, имеют вид зерен чечевицы), так и R-формы колоний (шероховатые, напоминают пушинки с уплотненным центром). При пребывании на воздухе колонии C. perfringens приобретают зеленоватый оттенок. На кровяном сахарном агаре большинство клостридий образуют вокруг колоний зоны гемолиза. При посеве на лакмусовое молоко C. perfringens через 1-3 ч вызывают выраженное створаживание молока. Другие виды клостридий медленно пептонизируют молоко или

не изменяют его. При росте на железосульфитной среде Вильсона- Блэра через 4-6 ч C. perfringens вызывает почернение среды и разрыв столбиков за счет газообразования.

Антигенная структура и факторы патогенности. В процессе жизнедеятельности клостридии продуцируют сильные экзотоксины, которые и определяют патогенез и клиническую симптоматику клостридиозов. C. perfringens образует 12 токсинов-ферментов с летальным и некротическим действием, что лежит в основе ее деления на шесть сероваров: A, B, C, D, E, F. Для человека патогенны серовары A, C и D. Главными токсинами являются альфа (α), бета (β), эпсилон (ε) и йота (ι).

показано 70 из 95

Заболевание у человека чаще связано с сероваром A (газовая гангрена, ПТИ) и изредка с сероваром C (некротизирующий энтероколит). C. perfringens серовара A продуцирует только α-токсин, обладающий свойствами фосфолипазы C. Он расщепляет лецитин клеточных мембран, лизируя клетки, обеспечивая не только внутритканевую инвазию возбудителя, но и внутрисосудистый гемолиз - символ смертельной клостридиальной токсинемии. Штаммы C. perfringens серовара A, продуцирующие энтеротоксин (белок), вызывают ПТИ. Токсин высвобождается в тонкой кишке при споруляции, где повреждает плазматическую мембрану энтероцитов, что усиливает потерю ионов натрия, хлора, воды и приводит к диарее. Энтеропатогенность C. perfringens серовара C связана с образованием β-токсина.

Резистентность. В отличие от вегетативных форм, споры клостридий устойчивы к действию физических и химических факторов.

Эпидемиология. Газовая гангрена - сапронозная инфекция. Благодаря спорообразованию клостридии способны длительно сохраняться, а при определенных условиях - и вегетировать в почве, воде и других объектах окружающей среды. Многие виды клостридий являются обитателями кишечника человека и животных, откуда они выделяются в окружающую среду. В кишечнике они питаются органическими остатками, не инвазируя живую, хорошо снабжаемую кровью ткань. Их относят к некропаразитам.

Микробиологическая диагностика. Материалы для исследования - кусочки пораженных тканей, раневое отделяемое, кусочки тканей и органов, кровь и т. д. Экспресс-диагностика предусматривает получение ориентировочного ответа через 1,5-2 ч после взятия материала и проводится с помощью бактериоскопии и РИФ, подтверждающей данные бактериоскопии. Обнаружение грамположительных палочек с обрубленными краями, неподвижных и образующих капсулу, свидетельствует в пользу наличия C. perfringens. К методам экспресс-диагностики относится также газожидкостная

показано 71 из 95

хроматография. Параллельно проводят ускоренный микробиологический анализ, включающий культивирование на средах обогащения и селективных средах и последующее определение токсинов возбудителей газовой гангрены в культуральной жидкости. С этой целью, а также для выявления токсинов в материалах, взятых на исследование (токсикологическое исследование), применяют РНГА, ИФА, латекс-агглютинацию. Летальную активность токсинов определяют в рН с соответствующими антитоксическими сыворотками на лабораторных животных (белых мышах). Окончательное установление вида проводят на основании изучения биохимических и токсигенных свойств возбудителя (48-72 ч).