Прижизненная (витальная) окраска

Взвесь микроорганизмов вносят в каплю 0,001% раствора метиленового синего или нейтрального красного (можно тушь, разведенную 1:10). Затем готовят препарат «висячей» или «раздавленной» капли. Микроскопию проводят при объективе 40, без иммерсионного масла, при опущенном конденсоре. После микроскопии препараты поместить в дез. раствор.

Занятие №6

Тема «Дезинфекция»

План занятия:

1. Антимикробное действие физических и химических факторов.

2. Асептика, антисептика, дезинфекция.

3. Антисептики, дезинфектанты

4. Дезинфекция отработанного биоматериала, микробных культур, объектов внешней среды.

5. Методы контроля эффективности дезинфекции

Цель: усвоив данный материал студент должен уметь готовить дезрастворы разной концентрации, проводить дезинфекцию адекватными методами.

Знать:

- характеристику физических и химических факторов, действующих на микроорганизмы

- сущность асептики, антисептики, дезинфекции

- виды дезрастворов, их характеристика

- методики приготовления дезрастворов разной концентрации

- методики дезинфекции конкретных объектов, встречаемых в микробиологической практике.

Жизнь микроорганизмов проходит под влиянием физических факторов внешней среды (температуры, влажности, ионизирующей радиации, ультразвука). Антимикробное действие температурного фактора зависит от биологических особенностей микроорганизмов, от формы их существования: вегетативная или споровая. Так вегетативные формы мезофиллов погибают при нагревании до 60º в течение 30-60 минут. Споровые формы устойчивы и погибают в течение 1 часа при 1,5 атм. Или 180º — 30 мин (суховоздушный способ). При высоких температурах происходит денатурация белка микробных клеток. При низких температурах многие микроорганизмы остаются жизнеспособными, впадая в анабиоз и временно прекращая свою активность (сохранение пищевых продуктов в холодильниках). Высушивание приводит к обезвоживанию клетки с развитием губительных необратимых процессов для нее. Это применяется при изготовлении биопрепаратов, иммунных сывороток, вакцин и т. д. Применяют лиофильную сумку: объект замораживают, затем высушивают в вакууме.

Ионизирующая радиация:

а) УФЛ — инактивируют ферменты клеток, ДНК. Применяют для санации боксов, рабочих комнат

б) альфа-бета-гамма лучи применяют для обеззараживания полистироловой лабораторной посуды, стерилизации ее шовного материала. Данные лучи разрушают ядерные структуры и ДНК.

Ультразвук — повышает внутриклеточное давление за счет активации газа внутри клетки, что приводит к разрыву клеточной оболочки. Используют для стерилизации молока, соков, воды.