Биологическая характеристика возбудителя чумы

Возбудитель чумы Yersiniae Pestis относится к роду иерсиний и является возбудителем особо опасной инфекции — чумы.

Морфология: Гр- палочка овоидной формы полиморфна. Спор и жгутиков нет. Имеет нежную капсулу. При окрашивании метиленовым синим отмечается биполярное окрашивание (концы окрашиваются интенсивнее, чем середина).

Тип дыхания: факультативные анаэробы.

Факторы патогенности: токсин (экзо и эндо), ферменты патогенности.

Культивирование: растет на простых питательных средах (МПА) при 28-30 градусах Цельсия через 12-14 часов. Для ускорения роста к МПА добавляют кровь. Элективная среда - среда Тумановского (среда с добавлением генцианвиолета для подавления сопутствующей микрофлоры). На питательных средах растут в R-форме. На плотных средах — колонии в виде глыбок с неровными краями превращающиеся через 48 часов в «кружевной платок». На жидких средах — пленка с тяжами (сталактитовый рост).

Биохимические свойства: расщепляет сахара (глюкозу, манит, мальтозу, арабинозу) до кислоты. Не расщепляет сахарозу, рамнозу.

Протеолитические свойства: образует сероводород, не разжижает желатину.

Антигенные свойства: бактерии чумы содержат групповой соматический О-антиген и видовой К-антиген.

Методы исследования: микроскопический, в т.ч. РИФ, биолологический (на морских свинках). Забор материала и лабораторное исследование проводится только в противочумных костюмах.

Материал для исследования зависит от локализации возбудителя:

1. Содержимое язвы или бубона

2. Мокрота

3. Кал

4. Кровь

5. Убитые блохи и грызуны

Алгоритм микробиологического исследования на чуму:

1. Микроскопия исследуемого материала (РИФ, окраска по Граму, метиленовым синим). Гр- палочки, при окраске метиленовым синим — биполярное окрашивание (концы более синие, чем центр. РИФ — светящиеся в люминисцентном микроскопе овоидные палочки.

2. Постановка биопробы для выделения чистой культуры. Заражение материалом морских свинок (загрязненные материал вводят подкожно, незагрязненный материал внутрибрюшинно). Гибель животных на 3-7 день. Вскрывают, выделение ЧК из органов животных.

3. Первичный посев исследуемого материала на среду Филдса — незагрязненный другой микрофлорой материал — кровь. Среду Туманского — загрязненный материал. Термостат при 28 градусах Цельсия на 12-24-48 часов.

4. Через 12 часов просмотр чашек — при наличии колонии в виде глыбок битого стекла, приготовление препаратов, окраска по Граму, метиленовым синим. Постановка пробы Творта — пробы с противочумным бактериофагом наносят на колонию и ставят в термостат при 28 градусах Цельсия на 12 часов. При положительном результате — лизис колонии.

5. Выделение ЧК путем посева на скошенный агар МПА (28 градусов Цельсия 12 часов).

6. Через 24 часа просмотр чашек и пробирок, учет результатов. Чашки — колонии в виде «кружевного платочка» - R-форма. Пробирки с МПБ — пленка с тяжами вниз «сталактитовый рост». Скошенный агар (ЧК) — вязкий сероватый налет. Проба Творта — лизис колонии. Предварительный ответ.

7. Идентификация ЧК по биохимическим свойствам (ряды Гисса). Проба Творта с ЧК (28 градусов Цельсия 12-14 часов). Окончательный ответ через 36-48 часов.

При исследовании погибших грызунов необходимо дифференцировать иерсинии чумы от иерсиний псевдотуберкулеза. В отличие от иерсинии чумы иерсинии псевдотуберкулеза расщепляют рамнозу и растут на голодных средах, не лизируются противочумным бактериофагом.