Микроскопический метод

1. Метод прямой микроскопии — при большом содержании.

2. Микроскопия после флотации (основной).

Для прямой микроскопии мокроту помещают в чашку Петри, петлей или иглой выбирают гнойный комочек, переносят его на край предметного стекла и растирая между двумя стеклами готовят мазок. Мазки окрашивают по Цилю-Нильсену для выявления кислотоустойчивости (фуксин Циля с прогревом, серная кислота, метиленовый синий). Микроскопируют просматривая не меньше 100 полей зрения. Микобактерии туберкулеза ярко-красные.

Чаще микроскопию проводят после флотоации, которая помогает увеличить содержание микобактерий туберкулеза в мазке.

Методика флотации мокроты (всплытия):

1. Гомогенизация мокроты — собранную мокроту помещают в бутыль (250мл), добавляют равный объем щелочи (1%KOH), закрывают пробкой и встряхивают 15 минут (до однородности).

2. К 100 мл дистиллированной воды добавляют 1 мл ксилола, вливают в бутыль с гомогенизированной мокротой, встряхивают 10 минут.

3. Доливают дистиллированной воды до горлышка и отстаивают 30 минут при комнатной температуре. На поверхности образуется сливкообразный слой, состоящий из капель ксилола с прилипшими к ним бактериями. Пастеровской пипеткой отсасывают это кольцо и готовят мазок несколько раз нанося материал на предметное стекло по мере его высыхания. Мазок обезвреживают эфиром, фиксируют на пламени и окрашивают по Цилю-Нильсену.

Микроскопический метод позволяет выявить наличие кислотоустойчивых микобактерий без определения их видовой принадлежности.