Микроскопия в проходящем свете

Микроскоп оптический – оптический прибор для получения сильно увеличенных изображений объектов (или деталей их структуры), не видимых невооруженным глазом. Он состоит из трех основных частей: механической, оптической и осветительной.

Разрешающая способность равного 0,1 мм микроскопа дает возможность различать структуры с расстоянием между элементами 0,2 мкм.

Разрешающая способность оптических приборов – величина, характеризующая способность этих приборов давать раздельное изображение двух близких друг к другу точек объекта. Наименьшее линейное расстояние между двумя точками, начиная с которого их изображения сливаются и перестают быть различимыми, называется линейным пределом разрешения. Обратная ему величина служит количественной мерой разрешающей способности оптических приборов.

Обычно микроскоп имеет двухступенчатую систему увеличения, образованную объективом и окуляром и обеспечивающую увеличение до 1500 крат. В оптическую схему микроскопа входят также элементы, необходимые для освещения объекта.

Механическая часть микроскопа или штатив состоит из ножки, основания, тубусодержателя, предметного столика, монокулярной насадки (тубуса), револьверного устройства, рукоятки грубой фокусировки (макрометрического винта), рукоятки тонкой фокусировки (микрометрического винта) (Рис. 11). Предметный столик служит для размещения на нем изучаемого препарата. Препарат закрепляют на столике зажимами (клеммами). В центре предметного столика находится отверстие для прохождения лучей света и освещения препарата. В некоторых конструкциях микроскопа предметный столик может передвигаться с помощью винтов, расположенных по периферии предметного столика. Это дает возможность рассмотреть препарат в различных полях зрения.

Оптическая часть является наиболее ценной частью микроскопа. Она состоит из объективов и окуляра.

Общее увеличение микроскопа определяется как произведение увеличения объектива на увеличение окуляра. Например, если в работе используют окуляр х15, а под тубусом находится объектив х90, то увеличение рассматриваемого с помощью микроскопа объекта составит х1350.

Осветительная система микроскопа состоит из двухлинзового конденсора, ирис-диафрагмы и патрона с низковольтной лампочкой накаливания. Конденсор служит для лучшего освещения препарата. Ирис-диафрагма располагается под конденсором и служит для регулировки потока света, поступающего в конденсор.

Рис. 11. Микроскоп МИКМЕД-5: 1 – основание микроскопа, 2 – коллектор в оправе, 3 – конденсор, 4 – винт крепления конденсора, 5 – предметный столик, 6 – объективы, 7 – револьверное устройство, 8 – бинокулярная насадка, 9 – окуляры, 10 – штатив, 11 – рукоятка перемещения предметного столика в двух взаимно-перпендикулярных направлениях, 12 – винтовой упор, 13 – препаратоводитель, 14 – винт грубой фокусировки, 15 – винт точной фокусировки.

Правила работы с микроскопом:

1. Установка микроскопа. Микроскоп необходимо поставить у края стола, окуляры должны находиться напротив глаз. Центрировать объектив малого увеличения, т.е. повернуть револьвер до щелчка так, чтобы объектив малого увеличения оказался над отверстием предметного столика. Если необходимо – салфетками протереть линзы объективов и окуляра. Полностью открыть диафрагму и поднять конденсор.

2. Освещение поля зрения. Если под предметным столиком нет лампы накаливания, то глядя в окуляр левым глазом (если он один), поворачивать зеркало в сторону источника света до максимально яркого и равномерного освещения поля зрения. После этого, чтобы не сбить освещение, двигать микроскоп нельзя.

3. Расположение препарата на столике. Положить препарат на предметный столик микроскопа покровным стеклом вверх. Рассматриваемый объект должен находиться точно под объективом малого увеличения.

4. Изучение объекта при малом увеличении. Под контролем глаза (смотрите на препарат не в окуляр, а сбоку!) опустить тубус так, чтобы расстояние между фронтальной линзой объектива и покровным стеклом препарата было около 0,5 см, затем, глядя в окуляр, с помощью макровинта поднять тубус до появления четкого изображения. Нельзя смотреть в окуляр и опускать объектив, вращая винт грубой наводки от себя! При необходимости получения более чёткого изображения открывают (закрывают) диафрагму или опускают конденсор.

5. Изучение объекта при большом увеличении. Повернуть револьвер объектива большого увеличения до щелчка. После нахождения изображения пользуются только микровинтом! Глядя в окуляр левым глазом, изучают объект. Для точной фокусировки и послойного изучения препарата в глубину пользуются микровинтом, поворачивая его не более, чем на пол-оборота от себя или к себе.

6. Перевод микроскопа на малое увеличение. При переводе микроскопа с большого увеличения тубус не поднимают, т.к. корпус малого объектива короче корпуса большого объектива и поэтому он не задевает препарат. Револьвер поворачивают до щелчка объектива малого увеличения.

7. Завершение работы. Препарат снимают со столика только после того, как микроскоп переведен на малое увеличение. На это увеличение микроскоп переводят после изучения очередного препарата, чтобы каждый раз начинать работу с малого увеличения.