Антидотная терапия и прифилактика отравлений ФОИ

В настоящее время для нужд сельского хозяйства и бытового применения широкого нарабатывается значительное количество фосфорорганических инсектицидов (ФОИ) существенно менее токсичных, чем ФОВ, однако способных вызывать е только тяжелые, но и смертельные отравления. Таким образом отравления могут приводить к большим санитарным потерям при авариях и грубых нарушениях техники безопасности в процессе производства, транспортировке, хранения и широкого применения инсектицидов на полях и животноводческих фермах. В свете сказанного, становится очевидным, что в мирное время сохраняется необходимость в создании эффективных антидотов фосфорорганических соединений. Эти лечебно-профилактические антидоты (ЛПА) в форме быстрораспадающихся таблеток или инъекционных растворов должны обеспечивать гарантированную защиту отравленных.

Теоретически технические требования к ЛПА для гражданского населения могут быть следующими:

1) Максимальный эффект должен достигаться через 20–30 минут и обеспечивать профилактическую защиту от поражения ФОС и ФОИ в дозах или концентрациях, вызывающих интоксикацию не менее чем средней степени тяжести, или отдалять сроки возникновения симптомов при более тяжелых отравлениях.

2) При «мнимом отравлении» ФОИ ЛПА не должен вызывать существенных нарушений самочувствия, симулирующих поражение ядом.

3) Действие антидота должно сохранятся в течении нескольких часов.

4) При лечебном применении антидот должен устранять отдельные проявления интоксикации или снижать степень ее тяжести.

5) Антидот должен быть комплексным и сбалансированным (хорошо переносимым).

Исходя из всего вышеизложенного была разработана модель лечебно-профилактического комплекса, представляющего собой безопасную композицию атропина с карбоксимом. Данная модель была опробована с профилактической целью. Для этого был проведен ряд опытов, в которых травили мышей фосфаколом п/к в условиях предварительного введения (за 15 минут) атропина (5 мг/кгк в/бр) и карбоксима (5 мг/кг в/бр). При этом величину ЛД50 определяли табличным методом.

Парадигма медицинской защиты от поражений ФОВ состоит в том, что она должна осуществляться в четыре не совпадающих по времени этапа:

- профилактика антидотом при наличии реальной угрозы отравления;

- лечение интоксикации с помощью антидота не ранее, чем после появления первых симптомов интоксикации;

- лечение расстройств функции жизненно важных органов и систем на этапах медицинской эвакуации;

- лечение осложнений и отдаленных последствий интоксикаций и медико-социальная реабилитация отравленных.

Предполагалось, что в случае аварийных ситуаций население будет обеспечено лечебно-профилактическим антидотом, который бы применялся после объявления химической тревоги. К настоящему времени созданы высокоэффективные профилактические (П-6; П-10 М) и лечебные (будаксим и пеликсим) антидоты. Однако опыт разработки антидотов свидетельствует о том, что создать профилактический или лечебный антидот проще, чем лечебно-профилактический.

Исходя из всего вышеизложенного была разработана модель лечебно-профилактического комплекса, представящего собой безопасную композицию атропина с карбоксимом. Данная модель была опробована не только с профилактической, но и с лечебной целью. Для этого был проведен ряд опытов, в которых травили мышей фосфаколом п/к в условиях последующего введения (через одну минуту) атропина (5 мг/кгк в/бр) и карбоксима (5 мг/кг в/бр). При этом величину ЛД50 определяли табличным методом. Для определения ЛД₅₀ были использованы четыре дозы,расположенные через две на третью (5,0; 10,0; 20,0; 40,0) по два животных на каждую дозу. В результате проведенного опыта были получены следующие эмпирические показатели летальности (0; 0; 1; 2), представленные в таблице??. Средняя эффективная доза и ее стандартная ошибка была найдена по пересечению строки с найденной «последовательностью реакций» со столбцом, соответствующим первой из испытанных доз. Таким образом ЛД₅₀ была найдена равной М±m=20,0±5,97. После определения ЛД₅₀ был произведен расчет кривой доза-летальность методом скользящей средней.

Таблица. Определение ожидаемых величин летальности с использованием метода скользящей средней с при оценке защитного действия карбоксима (внутрибрюшинно в дозе 5 мг/кг) и атропина (внутрибрюшиннов дозе 5 мг/кг) в качестве модели профилактического антидота в опытах на белых мышах. Использовано 2 особи на дозу.

Доза фосфакола в мг/кг	эмпири-ческая	первое исправление	второе исправление	третье исправление
5,0
10,0
20,0
40,0

Можно допустить, что если при дозе карбоксима, 5,0 мг/кг выжили обе мыши, то при дозе равной 2,5 мг/кг, которая является предыдущей дозе 5,0 согласно логарифмической шкале, тем более выживут оба животных. А если при дозе введения равной 40,0 мг/кг практически погибли обе мыши, то вполне вероятно, что при дозе 80,0 мг/кг (последующей) тем более оба животных погибнут. Поэтому на представленном ниже графике указаны вышеперечисленные дозы (2,5 и 80,0 мг/кг) для наглядного изображения кривой летальности.

В настоящее время в России лечебно-профилактических антидотов (ЛПА) для сельского хозяйства не существует, а разработка сложных лечебно-профилактических антидотов приведет к резкому увеличению цены на него, было предложено испытать реально существующие препараты отечественной промышленности.

Распространенным антидотом является атропин, который до настоящего времени сохраняет свое значение как в нашей стране, так и за рубежом. Однако атропин требовал существенного повышения эффективности за счет какой- либо добавки.

Последовательное испытание и определение защитного действия атропина в реальной для мышей дозе, привело к убеждению, что один атропин не гарантирует защиту животных от гибели при отравлении фосфаколом. Таким образом, применение атропина в качестве самостоятельного профилактического, тем более лечебного препарата не достаточно эффективно. Казалось бы выход можно было найти в повышении дозы атропина, но за повышением дозы автоматически увеличивается его токсический эффект, а следовательно происходит отравление самим противоядием.

Среди известных реактиваторов холинэстеразы карбоксим, на сегоднешний день, является одним из наиболее лучших. Карбоксим был синтезирован в Институте токсикологии Минздрава России и сочетает в себе как свойства реактиваторов холинэстеразы, так и свойства необратимых ингибиторов холинэстеразы., то есть годен как для лечебного так и для профилактического применения.

По результатам работы Кривого и Прозоровского на нервно-мышечном препарате крысы, в условиях блокирования ХЭ фосфаколом был подтвержден выраженный лечебный реактивирующий эффект карбоксима и обнаружен его профилактический эффект, предположительно связанный с обратимым анти-ХЭ действием карбоксима. Исходя из сходства строения молекулы карбоксима с молекулой неконкурентного ингибитора оксазила- бисчетвертичного аммониевого производного.

Фосфакол при всех частотах стимуляции сначала повышал, а затем дозозависимо снижал амплитуду сокращений диафрагмы. Карбоксим в концентрации 10 мг/л в первые 30 минут вызывал увеличение амплитуды сокращений мышц как при одиночных так и тетанических раздражениях. Начальный потенцирующий эффект может быть связан с наличием у вещества антихолинэстеразного действия, что и послужило предпосылкой для включения его в качестве одного из компонентов модели лечебно-профилактического антидота против фосфорорганических инсектицидов для сельского хозяйства и животноводства. В случае «профилактического» введения в инкубат карбоксима отмечено ослабление блокирующего действия фосфакола при частотах стимуляции даже при концентрации ингибитора 0,5мг/л, соответствующей ЛД_50. «Лечебное» применение карбоксима через 30 минут после начала инкубации с фосфаколом приводило к восстановлению одиночных и тетанических сокращений.Эффект предварительного прменения карбоксима был более выражен, чем лечебного.

Карбоксим проникает через гематонцефалический барьер, чем принципиально отличается от оксазила и всех других бисчетвертичных соединений. Вызываемое карбоксимом повышение амплитуды сокращений диафрагмы, а также превышение его профилактического действия над лечебным, позволяет предпологать, что в его защитном эффекте, наряду с реактивирующим, принимает участие также и способность предохранять ХЭ от ее необратимой связи с фосфаколом.

Последовательно было испытано и определено защитное действие карбоксима в рекомендованной для мышей дозе, что привело к убеждению о том что карбоксим гарантирует защиту животных от отравляющего вещества (ИГЗ=1,3) при его профилактическом применении. Полученный индекс гарантированной защиты сам по себе является не достаточно высоким. Тогда как, очевидно, что при его лечебном применении ИГЗ будет гораздо ниже.

Таким образом, все вышесказанное привело к убеждению в недостаточности лечебно-профилактического применения препаратов (атропина и карбоксима) в отдельности. Все это послужило поводом для создания модели лечебно-профилактического антидота состоящего из комплекса препаратов. Было представлено совместное применение атропина с карбоксимом как с профилактической так и с лечебной целью. Для этого был проведен ряд опытов, в которых травили мышей фосфаколом п/к в условиях предварительного (последующего) введения (за 15 минут и через одну минуту после отравления) атропина в дозе 5 мг/кг в/бр и карбоксима 5 мг/кг в/бр. В результате проведенных опытов было выявлено существенное возрастание индекса защиты (ИЗ) при совместном применении атропина с карбоксимом с профилактической (ИЗ=28) и с лечебной целями (ИЗ=25) по сравнению с индексом защиты карбоксима (ИЗ=4,7) и атропина ИЗ=2,2, применяемых в качестве самостоятельных антидотов. Несмотря на увеличение показателя кривой индекс гарантированной защиты (ИГЗ) тоже существенно возрастает при совместном применении атропина с карбоксимом с профилактической (ИГЗ=1,9) и с лечебной целями (ИГЗ=1,7) по сравнению с индексом гарантированной защиты карбоксима (ИГЗ=1,3) и атропина (ИГЗ=0,6), используемых в качестве самостоятельных антидотов.

Таким образом, задачи поставленные исследованием были решены и цель, которая была сформулирована как разработка модельного лечебно-профилактического антидота, предназначенного для рабочих сельского хозяйства в целом достигнута.