Определение содержания гемоглобина гематиновым методом

(метод Сали)

Цель: определить содержание гемоглобина в крови.

Объект исследования: человек.

Оборудование и материалы: игла-скарификатор, гемометр Сали, капилляр для забора крови при определении содержания гемоглобина, 0,1 N раствор соляной кислоты, марлевые салфетки, вата, спирт, настойка йода, дистиллированная вода, почкообразный тазик.

Порядок выполнения. Гемометр Сали (Рис. 14.4) представляет собой штатив, задняя сторона которого сделана из матового стекла. В штативе имеются три гнезда, в которые вставлены пробирки одинакового диаметра. Боковые пробки запаяны и содержат стандартный раствор гемоглобина (167 г/л), являясь эталоном для сравнения.

Средняя открытая пробирка предназначена для исследуемой крови и градуирована. На пробирке встречаются три типа градуировки: грамм/литр (г/л), грамм-проценты (г%) и относительные единицы (ед).

В среднюю пробирку гемометра налить до нижней круговой метки «10» 0,1 N раствор соляной кислоты. Соединить капилляр с резиновой трубкой. Набрать кровь из пальца в капилляр до метки «20» (первую каплю крови снять ватой).

Рис. 14.4. Гемометр Сали:

1 – корпус – стойка, 2 – крышка, 3 – винты, 4 – запаянные пробирки со стандартным раствором, 5 – градуированная пробирка, 6 – матовое стекло

Конец капилляра обтереть ватой, затем осторожно, не вызывая образования пены, выпустить кровь в кислоту. После этого содержимое пробирки перемешать, ударяя пальцем по ее концу, и оставить стоять 5–10 мин. Это время необходимо для полного превращения гемоглобина в солянокислый гематин, окрашивающий раствор в коричневый цвет. Спустя указанное время, к раствору в пробирке постепенно прибавлять, постоянно перемешивая, по каплям дистиллированную воду до тех пор, пока окраска жидкости в пробирке не будет совершенно одинаковой с окраской стандарта гемометра. Когда цвет раствора во всех пробирках станет одинаковым, определить, какой цифре по шкале соответствует уровень солянокислого гематина в средней пробирке. Деления по шкале гемометра показывают количество гемоглобина в граммах на 100 мл крови (г%). Перевести результаты в г/л.

Результаты. Указать найденное количество гемоглобина в г/л.

Выводы. Сравнить найденное количество гемоглобина с нормой.

В норме содержание гемоглобина у взрослого мужчины составляет 140–170 г/л, у женщин этот показатель ниже (120–150 г/л).

Следует отметить, что на современном уровне развития методов диагностики не ограничиваются определением общего количества гемоглобина. Решающее диагностическое значение имеет определение качественного состава гемоглобина (карбоксигемоглобин, метгемоглобин, гликозилированный гемоглобин и др.).