Принцип. Метод основан на использовании сопряженных ферментативных реакций, осуществляемых: 1) липазой, катализирующей гидролиз триацилглицеролов до спирта глицерола и

Метод основан на использовании сопряженных ферментативных реакций, осуществляемых: 1) липазой, катализирующей гидролиз триацилглицеролов до спирта глицерола и жирных кислот; 2) глицеролкиназой, катализирующей фосфорилирование глицерола; 3) глицеролфосфат­оксидазой, окисляющей глицерол-3-фосфат в присутствии О₂ до диоксиацетонфосфата с образованием Н₂О₂; 4) пероксидазой, катализирующей в присутствии хлорфенола окисление перекисью водорода 4-аминоантипирина с образованием хинонимина, окрашенного продукта розового-малинового цвета.

Материал исследования

Сыворотка крови.

Реактивы

Рабочий реактив: раствор липазы, глицеролкиназы, глицеролфосфатоксидазы, пероксидазы, хлорфенола, 4‑аминоантипирина в буферном растворе.

Стандартный раствор триацилглицерола (триолеат), 2,29 ммоль/л.

Проведение анализа

	Опыт, мл	Стандарт, мл
Сыворотка крови	0,03	––
Стандартный р-р триацилглицерола	––	0,03
Рабочий реактив	3,0	3,0
	Инкубируют 20 минут при 20-25°С, измеряют оптическую плотность опытной и стандартной проб против воды при 540 нм (зеленый светофильтр)

Расчет

Концентрация триацилглицеролов, ммоль/л = , где

Е_оп и Е_ст – оптическая плотность опытной и стандартной проб,
С_ст – концентрация стандартного раствора