Работа 2. Определение резус-фактора экспресс-методом в пробирках без подогрева

ЦЕЛЬ: Научиться определять Резус-принадлежность исследуемой крови.

Методика. Для работы необходимо иметь специально приготовленный универсальный реагент-антирезус, пипетки Пастера, пробирки объемом не менее 10 мл. 0,9% раствор хлорида натрия, скарификаторы, ватные тампоны, спирт. Кровь для исследования следует брать в количестве 1-2 мл в сухую пробирку без стабилизатора. На пробирке написать фамилию и инициалы лица, у которого взята кровь. Обычно после свертывания крови на дне пробирки остается небольшое количество свободных эритроцитов, которые следует употреблять для исследования. Если этих эритроцитов недостаточно, следует встряхнуть сверток для большого количества эритроцитов. Может быть использована свежая несвернувшаяся кровь, взятая из пальца непосредственно перед исследованием.

Последовательность выполнения работы. На дно пробирки внесите 1 каплю антирезусной сыворотки и 1 каплю исследуемой крови. Пробирку встряхнуть и несколько раз перевернуть так, чтобы содержимое ее растеклось по стенкам. Это значительно ускоряет агглютинацию и делает ее крупно-лепестковой. Агглютинация на стенках пробирки наступает как правило, в течении первой минуты, но для образования устойчивого комплекса «антиген – антитело» и четко выраженной агглютинации, а также в случае замедленной реакции при слабо выраженном резус-антигене наблюдение следует проводить не менее 3 мин. Для исключения неспецифической агглютинации эритроцитов в пробирку добавить 2-3 мл 0,9% раствора хлорида натрия и перемешать путем 1-2 кратного перевертывания пробирки. Не взбалтывать. Оценку результатов проводить визуально по наличию или отсутствию агглютинации эритроцитов. При положительном результате агглютинаты легко различимы в виде красных зерен или хлопьев на прозрачном, почти бесцветном фоне жидкости. При отрицательном результате в пробирке видна равномерно окрашенная в розовый цвет слегка опалесцирующая жидкость.

Рекомендации к оформлению протокола работы: По полученным результатам определите резус-принадлежность исследованной крови, опишите причину появления или отсутствия агглютинации. Нарисуйте пробирки с резус- отрицательной и резус-положительной кровью.