Подсчет лейкоцитов в исследуемой крови

ЦЕЛЬ: Освоить методику подсчета лейкоцитов в камере Горяева, используя знания о функциях лейкоцитов и механизмах регуляции их количества в периферической крови уметь оценивать результаты лабораторного исследования количества лейкоцитов.

Методика выполнения работы. Подсчет лейкоцитов производится так же в камере Горяева, но не в малых, а в больших квадратах. Сторона такого квадрата равна 1/5 мм, а объем жидкости над каждым квадратом в камере равен 1/5 1/5 1/10=1/250мм³. Для подсчета лейкоцитов кровь разводят в 20 (10) раз 6% раствором уксусной кислоты, подкрашенной метиленовой синью. Уксусная кислота разрушает оболочки эритроцитов, благодаря чему последние не мешают подсчету лейкоцитов, а окраска ядер лейкоцитов метиленовой синью улучшает их видимость.

Последовательность выполнения работы. Обработать безымянный палец левой руки спиртом, проколоть скарификатором, снять ватным тампоном каплю крови. Выдавить следующую каплю и натянуть в капилляр смесителя для лейкоцитов до отметки 0,5. Быстро втянуть раствор уксусной кислоты до метки 11, перемешать кровь с раствором в расширенной части смесителя и заполнить счетную камеру. Лейкоциты удобнее считать при малом увеличении микроскопа (окуляр 15, объектив 20).

Сосчитать число лейкоцитов в 25 больших квадратах. Как и при подсчете эритроцитов, учитывают лейкоциты, лежащие внутри квадрата, на левой и верхней границах его и не учитывают те, которые лежат на правой и нижней границах. Вычисляют среднее количество лейкоцитов в одном квадрате. Определить количество лейкоцитов в 1 куб. мм. неразведенной крови и в 1 литре (по СИ)

ФОРМУЛА ДЛЯ ВЫЧИСЛЕНИЯ КОЛИЧЕСТВА ЛЕЙКОЦИТОВ:

где: Х - искомое число лейкоцитов в 1 мм³ крови, Л - сумма лейкоцитов в 25 больших квадратах, 20 – разведение, 1/250 - объем большого квадрата в мм³

Рекомендации к оформлению протокола. При оформлении протокола нарисовать сетку Горяева и вписать в 25 больших квадратов найденное количество лейкоцитов. Сравнить результат исследований крови с нормой. При отклонении от нормы указать возможные причины данного несоответствия.