Аппарат для перегонки с водяным паром, снабженный водо­отделителем. 1 страница

В отличие от аппарата для перегонки летучих веществ с водяным паром, применяемого в химико-токсикологи­ческом анализе (см. рис. 6.1. ), в химических лабораториях для этой цели применяют аппараты, снабженные водоотделителями (брызгоуловителями). Этот аппарат отличается от приведенного выше аппарата для перегонки с водяным паром наличием водо­отделителя, расположенного между парообразователем и колбой для перегонки (рис. 6.2).

Водоотделитель 2 представляет собой низкогорлую колбу вместимостью 200—250 мл, закрытую пробкой с тремя отвер­стиями. В одно отверстие вставляют стеклянную трубку, через которую поступает водяной пар из парообразователя 1, во вто­рое— стеклянную трубку, через которую из водоотделителя по­ступает водяной пар в колбу для перегонки 4, в третье—водо­сливную стеклянную трубку 3, на которую одевают кусок рези­нового шланга с зажимом. Эта трубка служит для спускания из водоуловителя воды, поступающей из парообразователя в виде брызг и образующейся в результате конденсации водяного пара, Воду, накопившуюся в водоотделителе в процессе перегонки, время от времени спускают через водосливную трубку.

После окончания перегонки летучих веществ с водяным паром открывают зажим на водосливной трубке, через которую в аппарат поступает воздух. В результате этого уравнивается давление во всех частях аппарата для перегонки с водяным паром. После этого прекращают нагревание парообразователя и через несколько минут отсоединяют от него колбу для пере­гонки.

При использовании аппарата для перегонки с водяным паром, снаб­женным водоуловителем, не происходит увеличение объема жид­кости в колбе для перегонки. При уменьшении или прекращении нагревания парообразователя не перебрасывается содержимое колбы для перегонки в парообразователь и исключается возмож­ность ожога рук парами воды при разъединении колбы и паро­образователя с кипящей водой.

Перегонка летучих веществ с водяным паром с помощью аппарата, снабженного водоуловителем, производится так же, как и с помощью аппарата без водоуловителя.

6.3. 3. Влияние рН среды на перегонку химических соединений с водяным паром

Вещества, перегоняемые с водяным паром, принадлежат к различным классам химических соединений. По химическим свойствам их можно подразделить на вещества кислого, основ­ного и нейтрального характера. В связи с этим, эти соединения необходимы переводит в в недиссоциированное (молекулярное) состояние.

Вещества кислого характера перегоняются с водяным паром из кислой среды, а вещества основного характера будут перегонятся из щелочной и частично из слабокислой среды. Вещества ней­трального характера перегоняются как из кислой, так и из щелоч­ной среды. Причем некоторые вещества нейтрального характера перегоняются из щелочной среды в больших количествах, чем из кислой среды. Амфотерные соединения перегоняются с водяным паром из кислой и щелочной среды аналогично веществам ней­трального характера. Однако амфотерные соединения в макси­мальных количествах перегоняются при рН, соответствующем изоэлектрической точке этих соединений. Для подкисления биологического материала перед перегонкой из него летучих ядов с водяным паром, применяют щавелевую или винную кислоту. Применение для этой цели сильных мине­ральных кислот в большинстве случаев является нежелательным.

При подкислении биологического материала минеральными кислотами с водяным паром перегоняется фенол, который посту­пил в организм извне и вызвал отравление, а также фенол, об­разовавшийся в кишечном тракте (в результате разложения белковых веществ пищи), а затем вступивший в реакцию конъюгации с сульфатами (см. гл. II, § 15). Если биологический материал под­кислить щавелевой или кислотой винной, то разложение конъюгата фенола с сульфатами не произойдет, а перегоняться будет только фенол, поступивший в организм извне и вызвавший отрав­ление. Под влиянием минеральных кислот могут разлагаться кислота синильная и ее соли с образованием кислоты муравьиной:

HCN + 2Н₂О + H⁺ à НСООН + NH₃

Однако в некоторых случаях для подкисления биологического материала, из которого отгоняют ядовитые вещества с водяным паром, применяют минеральные кислоты (фосфорную или серную). В частности, эти кислоты применяют для подкисления био­логического материала, исследуемого на наличие кислоты уксусной, которая относительно хорошо диссоциирует на ионы и только в незначительном количестве перегоняется с водяным паром. При подкислении биологического материала минеральными кислотами подавляется диссоциация кислоты уксусной, которая переходит в недиссоциированное состояние и хорошо перегоняется с водя­ным паром.

6.3.4. Перегонка ядовитых веществ с водяным паром из подкисленного биологического материала

В химико-токсикологических лабора­ториях ЦСМ МЗ РК для изолирования одной из групп ядовитых веществ применяют описанный ниже метод, основанный на перегонке их с водяным паром из подкисленного биологического материала, Перегонку летучих веществ с водяным паром производят с по­мощью аппарата, представленного на рис. 2.

100 г биологического материала (внутренних органов трупа пли других объектов биологического происхождения) тщательно измельчают ножницами, вносят в круглодонную колбу аппарата для перегонки с водяным паром, прибавляют воду до получения кашицеобразной массы, которую подкисляют насыщенным вод­ным раствором кислот щавелевой или винной до рН 2.0 – 2.5 (содержимое колбы для перегонки не должно превышать ¹/з ее объема). После подкисления содержимого колбы ее сразу же закрывают пробкой, снабженной двумя стеклянными трубками. Через одну трубку, доходящую почти до дна колбы, колбу для перегонки присоединяют к парообразователю с кипящей водой. Через другую, изогнутую почти под прямым углом, стеклянную трубку колбу присоединяют к холодильнику Либиха, охлаждае­мому холодной водой. На конец холодильника Либиха при по­мощи пробки одевают аллонж для стекания дистиллята в прием­ник. После соединения всех частей аппарата приступают к пере­гонке летучих веществ с водяным паром, из биологического материала. При этом вода в парообразователе и в водяной бане, в которую установлена колба для перегонки, должна быть нагре­та до кипения.

Первую порцию дистиллята в количестве 3 мл собирают в приемник, содержащий 2—3 мл 2 %-го раствора натрия гидроксида. При этом конец аллонжа должен быть погружен в ука­занный раствор щелочи. Собранный в раствор щелочи дистил­лят используют для обнаружения в нем цианидов. Затем в кони­ческие колбы вместимостью 50 мл собирают 1—2 порции дистил­лята по 25 мл.

Если в обоих дистиллятах реакции на соответствующие веще­ства положительные, то перегонку продолжают до тех пор, пока реакции дистиллятов на эти вещества не станет отрицательной. После окончания перегонки разъединяют парообразователь и колбу для перегонки, а затем прекращают нагревание паро­образователя и водяной бани.

Полученные дистилляты исследуют на наличие представи­телей отдельных веществ этой группы ядов. Учитывая незначи­тельную растворимость в воде некоторых из них (спирт изоамиловый, анилин, фенол, крезолы), их концентрируют экстрагиро­ванием из дистиллятов органическими растворителями (эфиром диэтиловым или хлороформом).

С помощью описанного выше метода из биологического материала перегоняются незначительные количества тетраэтил-свинца, этиленгликоля и кислоты уксусной. Поэтому для иссле­дования биологического материала на наличие этих веществ при­меняются специальные методы, приведенные ниже.

Для количественного определения обнаруженных веществ берут новую порцию биологического материала и отгоняют из него вещества, которые затем определяют количественно.

6.3.5. Перегонка ядовитых веществ с водяным паром из подкисленного, а затем из подщелоченного биологического материала

Учитывая, что из подкисленного биологического материала не все летучие ядовитые вещества перегоняются с водяным паром, предложен метод, согласно которому перегонку этих веществ производят последовательно из подкисленных, а затем из под­щелоченных объектов биологического происхождения. Перегонку летучих ядовитых веществ с водяным паром производят при по­мощи аппаратов, представленных на рис. 2 и на рис. 3.

Подготовку аппарата, порядок перегонки и сбор дистиллятов из подкисленного биологического материала производят также как указана выше. Полученные дистилляты используют для обнаружения лету­чих ядов, перегоняемых с водяным паром из кислой среды. В первой порции дистиллята, собранного в раствор натрия гидроксида, определяют наличие кислоты синильной (цианидов). В последующих дистиллятах, собранных в колбы вместимостью 50 мл, определяют наличие ядовитых веществ, которые пере­гоняются с водяным паром из кислых растворов. Эти вещества перегоняются примерно в такой последовательности: кислота синильная, фосфор желтый, эфир диэтиловый, хлороформ, ацетон, спирты алифатического ряда, нитробензол, кислоты муравьиная и уксус­ная, хлоралгидрат, формальдегид, сероуглерод, кислота сали­циловая и др.

После отгонки ядовитых веществ из подкисленного биологи­ческого материала в охлажденную перегонную колбу с биоло­гическим материалом небольшими порциями прибавляют 5 % водный раствор натрия гидроксида до щелочной реакции (по лакмусу). Колбу для перегонки закрывают своей пробкой, помещают на кипящую водяную баню, присоединяют к парообразователю с кипящей водой и к холодильнику Либиха, а затем производят перегонку. При этом собирают 3—4 порции дистиллятов (по 10—15 мл) в конические колбы вместимостью 50 мл, содержащие по 5 мл 0.1 М кислоты хлороводородной. В процессе перегонки конец аллонжа должен быть погружен в указанный раствор кислоты хлороводородной.

Полученные дистилляты исследуют на наличие анилина, пири­дина, ареколина, кониина, никотина, анабазина, эфедрина, фена­мина и ряда других веществ основного и нейтрального характера.

6.3.6. Фракционная перегонка веществ, содержащихся в дистиллятах

После перегонки с водяным паром концентрация ядовитых веществ в дистиллятах может быть незначительной. В ряде слу­чаев в дистиллятах содержатся ядовитые вещества, концентра­ция которых находится ниже предела их обнаружения. Кроме этого, с водяным паром могут перегоняться летучие примеси, являющиеся продуктами гнилостного разложения биологического материала. Эти примеси могут давать некоторые реакции, при­меняемые для обнаружения ядов, летучих с водяным паром.

Учитывая указанное выше, в отдельных случаях дистилляты подвергают фракционной (дробной) перегонке. С помощью фрак­ционной перегонки можно разделить смеси веществ на отдельные компоненты или на небольшие группы компонентов, имеющих близкие температуры кипения. После фракционной перегонки получаются более концентрированные растворы соответствующих веществ, чем в дистилляте, полученной перегонкой.

Фракционную перегонку производят в колбах, снабженных дефлегматорами. Для более полного разделения жидкостей по температурам кипения вместо дефлегматоров применяют фрак­ционные колонки.

Таким образом, в химико-токсикологическом анализе метод фракционной (дробной) перегонки приме­няется для выделения из смесей некоторых веществ, перегоняю­щихся с водяным паром, а также для очистки и концентрирова­ния этих веществ.

Способы фракционной перегонки подробно описаны в ряде практических руководств по органической и физической химии.

Кроме вышеописанных методов перегонки ядовитых соединений из объектов исследования может быть использована и метод сухой дистилляции для веществ возгоняемых при высокой температуре (фенол, бензойная кислота, отдельные хлорорганические пестициды). Однако этот метод не нашел применения в химико-токсикологическом анализе.

6.4. Отдельные представители ядовитых веществ, изолированных из биологического материала

6.4.1. КИСЛОТА СИНИЛЬНАЯ

Кислота синильная (кислота циановодородная) —газ или бесцветная жидкость (т. кип. 25.6°С, т. пл.— 13.3°С, плотность 0.699 г/см³), имеет запах горького миндаля, легко смешивается с водой и с рядом органических растворителей. При температуре 13.3°С кислота синильная, образует волокнистую кристаллическую массу. Кислота синильная является слабой кислотой. Ее вытесня­ют из солей даже углекислота и слабые органические кислоты.

В свободном состоянии в природе кислота синильная не встречается. Она встречается в виде химических соединений, к числу которых относятся гликозиды (амигдалин, пруназин, дуррин и др.). Амигдалин содержится в семенах горького миндаля, косточках персиков, абрикосов, слив, вишен, в листьях лавровиш­ни и др. Этот гликозид под влиянием фермента эмульсина, а так­же под влиянием кислот разлагается на глюкозу, бензальдегид и кислоту синильную. Пруназин содержится в пенсильванской вишне, а дуррин — в просе. Синильная кислота может образовы­ваться при горении целлулоида. Следы этой кислоты содержатся в табачном дыме.

Соли кислоты синильной (цианиды) легко гидролизуются в воде. При хранении водных растворов цианидов при доступе углерода диоксида они разлагаются:

KCN + Н₂О + С0₂ à HCN + КНС0₃; KCN + 2Н₂0 à NH₃ + HCOOK

В водных растворах разлагаются не только цианиды, но и сама кислота синильная:

HCN + 2Н₂0 à HCOONH₄

Применение. Действие на организм. Кислота синильная и ее соли применяются для синтеза ряда органических соединений, при добыче золота, для дезинфекции и дезинсекции, для борьбы с вредителями растений и т. д. Из соединений синильной кислоты, применяемых в народном хозяйстве, большое значение имеют натрия и калия цианиды.

Кислота синильная и ее соли очень ядовиты. По токсичности кислота синильная превосходит многие известные яды. Поэтому с кислотой синильной и ее солями следует обращаться очень осторожно. Следует помнить, что от прибавления сильных кислот к цианидам сразу же выделяется кислота синильная, которая может быть причиной тяжелых, а иногда и смертельных отравле­ний. Отравления могут давать и различные соединения кислоты синиль­ной (хлорциан, бромциан и др.). Отмечены случаи отравления людей семенами миндаля. По данным М. Д. Швай­ковой (1975), смерть у взрослых может наступить при поедании 40—60 штук, а у детей— 10—12 штук семян миндаля. При вды­хании больших концентраций кислоты синильной смерть может наступить мгновенно от остановки дыхания и сердца. Учитывая высокую токсичность кислоты синильной и ее солей, работать с ними в лаборатории можно только в вытяжном шкафу с хоро­шей вентиляцией.

Кислота синильная угнетает внутриклеточные железосодер­жащие дыхательные ферменты. При угнетении цитохромоксидазы кислотой синильной клетки организма не усваивают кислород, поступающий с кровью. В результате этого наступает клеточное кислородное голодание, несмотря на то, что кровь насыщена кислородом. Цианиды также могут блокировать гемоглобин кро­ви, нарушая его функции.

Кислота синильная может поступать в организм с вдыхаемым воздухом и частично через неповрежденную кожу, а цианиды — через пищевой канал.

Метаболизм. Метаболитом кислоты синильной является тиоцианат (роданид), который образуется в организме при конъюга­ции цианидов с серой под влиянием фермента роданазы.

6.4.1.1. Обнаружение кислоты синильной и цианидов химическими методами

Изолирование кислоты синильной и цианидов из биологиче­ского материала производят перегонкой с водяным паром. Для этой цели собирают 3—5 мл первого дистиллята в пробирку содержащую 2 мл 2 % раствора натрия гидроксида. Посколь­ку кислота синильная быстро разлагается в организме, исследо­вание биологического материала на наличие этой кислоты и ее солей желательно проводить сразу же после вскрытия трупов.

При отравлении кислотой синильной и цианидами на химико-токсикологическое исследование берут желудок с содержимым, печень и почки. Ввиду быстрого разложения кислоты синильной и цианидов в тканях организма эти яды можно обнаружить в содержимом желудка и не обнаружить в паренхиматозных органах.

При заключении об отравлении кислотой синильной и циани­дами (на основании результатов химико-токсикологического ана­лиза биологического материала) следует учитывать то, что циа­ниды в небольших количествах (около 6 мкг%) могут быть в моче лиц, не подвергавшихся воздействию этих соединений. В моче курящих количество цианидов может быть почти в 3 раза больше, чем в крови некурящих. В крови цианиды могут обра­зовываться и посмертно.

Для обнаружения синильной кислоты в дистилляте приме­няют несколько реакций, из которых наиболее доказательной является реакция образования берлинской лазури. Другие опи­санные ниже реакции используют как вспомогательные, а также для обнаружения цианидов в порошках, жидкостях и в других объектах.

Реакции на синильную кислоту и ее соли выполняют под тягой.

Реакция образования берлинской лазури. От прибавления железа(II) сульфата к щелочному раствору цианидов, образует­ся железа (II) цианид, который при взаимодействии с избытком цианидов, а затем с сульфатом или железа(III) хлоридом обра­зует берлинскую лазурь:

HCN + NaOH à NaCN + Н₂О;

2NaCN + FeS0₄ àFe (CN)₂ + Na₂S0₄;

Fe (CN)₂ + 4NaCN Na₂ [Fe (CN)₂];

3Na₄ (Fe (CN)₂] + 4FeCl₃ à Fe₄ [Fe (CN₆]₃ / + l2NaCl

При образовании берлинской лазури происходят и побочные реакции между солями железа и щелочью (образуются железа гидроксиды).

Для растворения осадка железа гидроксидов и нейтрализации избыт­ка щелочи прибавляют кислоту до кислой реакции среды. Большой избыток прибавленной кислоты может замедлить процесс обра­зования берлинской лазури.

Выполнение реакции. К нескольким миллилитрам дистиллята, собранного в раствор щелочи, прибавляют 1—4 капли разбав­ленного раствора железа (II) сульфата и такой же объем раз­бавленного раствора железа(III) хлорида. Смесь хорошо взбал­тывают и нагревают на пламени газовой горелки почти до кипения, а затем охлаждают до комнатной температуры и прибавля­ют 10% кислоту хлороводородную до слабокислой реакции на лакмус. Появление синего осадка или синей окраски указывает на наличие кислоты синильной (цианидов) в дистилляте.

Предел обнаружения: 20 мкг кислоты синильной в 1 мл раст­вора. Предельная концентрация 1: 100000. При количествах кислоты синильной, превышающих 30 мкг в 1 мл, образуется синий осадок. При наличии 20—30 мкг кислоты синильной в 1 мл раствора появляется зеленая или голубоватая окраска. При малых количествах кислоты синильной в растворах синяя окраска по­является только через 24—48 ч. При длительном отсутствии синего осадка или синей окраски к смеси прибавляют 5 % раствор бария хлорида. При этом выпадает осадок бария сульфата и происходит соосаждение берлинской лазури.

Осадок берлинской лазури может быть представлен судебно-следственным органам как доказательство наличия кислоты синильной или цианидов в исследуемых объектах.

Реакция образования железа роданида. Эта реакция основана на том, что при нагревании цианидов с раствором аммония полисульфида образуется роданид, от прибавления к которому раство­ра железа(III) хлорида появляется кроваво-красная окраска:

KCN + (NH₄)₂ S₂ KSCN + (NH₄)₂ S;

3KSCN + FeCl₃ Fe (SCN)₃ + 3KC1

Выполнение реакции. К 2—3 мл исследуемого раствора при­бавляют 3—5 капель 10—20 %-го раствора аммония полисульфида и смесь упаривают на водяной бане до небольшого объема. К упаренной жидкости по каплям прибавляют 8 % кислоту хлороводородную до кислой реакции (по лакмусу), а затем при­бавляют 1 каплю 10 % раствора железа(III) хлорида. Появ­ление кроваво-красной окраски указывает на наличие цианидов в растворе. При взбалтывании окрашенного раствора с эфиром диэтиловым окраска переходит в эфирный слой.

Предел обнаружения: 10 мкг кислоты синильной в 1 мл.

Реакция образования бензидиновой сини. Соли меди(II) с цианидами образуют дициан (CN)₂, при взаимодействии кото­рого с водой выделяется кислород, окисляющий бензидин. Про­дуктом окисления бензидина является бензидиновая синь:

2HCN + Сu(СН₃СОО)₂ à Cu (CN)₂ + 2СН₃СООН;

2Cu (CN)₂ à (CN)₂ + 2CuCN;

(CN)₂ + H₂0 à О + 2HCN

+ 2НХ+Н₂0

Бензидиновая синь

Выполнение реакции. Для выполнения этой реакции пользуют­ся индикаторной бумагой, смоченной смесью растворов меди(II) ацетата и бензидина.

В колбу вносят 2—3 мл исследуемого раствора, к которому прибавляют 1 мл 10 раствора кислоты винной. Колбу сразу же закрывают пробкой, к которой прикреплена влажная инди­каторная бумага. Затем колбу нагревают несколько минут на водяной бане. При наличии синильной кислоты или ее солей в пробе бумага синеет.

Приготовление индикаторной бумаги (см. Приложение 1, реактив 6).

Реакция с кислотой пикриновой. От прибавления кислоты пикриновой и щелочи к цианидам образуется соль кислоты изопурпуровой, имеющая красную окраску:

Выполнение реакции. К 1 мл щелочного дистиллята прибав­ляют 1 мл 0.5 % раствора кислоты пикриновой и слегка на­гревают на водяной бане. При наличии цианидов раствор при­обретает красную окраску. Подобную окраску с кислотой пикриновой дают и некоторые другие вещества (альдегиды, ацетон, сульфиты и др.). Поэтому реакция с кислотой пикриновой на цианиды имеет значение только при отсутствии цианидов в ди­стилляте.

Обнаружение цианидов методом микродиффузии. Кислоту синильную и ее соли можно обнаружить методом микродиффузии, который основан на реакции с пиридином и кислотой барбитуровой. Способ обнаружения цианидов методом микродиффузии опи­сан выше (см. 5.6.6.2.).

6.4.2. ФОРМАЛЬДЕГИД

Формальдегид (альдегид кислоты муравьиной) - газ, хоро­шо растворимый в воде, обладающий острым специфическим за­пахом. Водный раствор, содержащий 36.5—37.5 % формальде­гида, называется формалином. Формальдегид образуется при неполном сгорании метана, при окислении спирта метилового и т. д. Газообразный формальдегид при комнатной темпера­туре легко полимеризуется с образованием параформальдегида. Известно несколько продуктов полимеризации газообразного формальдегида. Один из полимеров формальдегида называется триоксиметилен (СН₂0)₃. Он имеет температуру плавления 63-64°С. В водных растворах также образуется параформальдегид, относящийся к полноксиметиленам, являющиеся продуктами полимеризации значительно большего числа молекул формальдегида. Параформальдегид при нагревании, особенно в присутствии кислот, частично деполимеризуется с образованием газообразного формальдегида.

Формальдегид изолируют из биологического материала путем перегонки с водяным паром. Однако этим методом пере гоняется только незначительная часть формальдегида. Считают, что формальдегид в водных растворах находится в виде гидрата (метиленгликоля), который трудно отгоняется с водяным паром:

нсно + нон à сн₂ (он)₂

Применение. Действие на организм. Формальдегид широко используется в промышленности для получения пластических масс и фенолоформальдегидных смол, дубления кож, консервиро­вания анатомических препаратов, получения гексаметилентетрамина, синтетического каучука, протравливания зерна, обработки помещений, тары с целью дезинфекции.

Формальдегид проявляет дубящее, антисептическое и дезодо­рирующее действие.. При вдыхании небольших количеств фор­мальдегида он раздражает верхние дыхательные пути. При вды­хании больших концентраций формальдегида может наступить внезапная смерть в результате отека и спазма голосовой щели. При попадании формальдегида в организм через рот могут на­ступить некротические поражения слизистой оболочки рта, пище­вого канала, появляется слюнотечение, тошнота, рвота, понос. Формальдегид угнетает центральную нервную систему, в резуль­тате этого может произойти потеря сознания, появляются судо­роги. Под влиянием формальдегида развиваются дегенеративные поражения печени, почек, сердца и головного мозга. Формальде­гид оказывает влияние на некоторые ферменты. 60—90 мл формалина являются смертельной дозой.

Метаболизм. Метаболитами формальдегида являются спирт метило­вый и кислота муравьиная, которые в свою очередь, под­вергаются дальнейшему метаболизму с выделением углекислоты и воды.

6.4.2.1. Обнаружение формальдегида химическими методами

В химико-токсикологическом анализе для обнаружения фор­мальдегида Н—СНО применяют реакции с кислотой хромотроповой, кислотой фуксинсернистой, с раствором кодеина в кислоте серной, с резорцином и др.

Реакция с кислотой хромотроповой. Кислота хромотроповая (1,8-диоксинафталин-3,6-дисульфокислота) с формальдегидом в присутствии кислоты серной дает фиолетовую окраску. При взаимодействии формальдегида с кислотой хромотроповой, кислота серная концентрированная одновременно является водоотнимающим средством и окислителем. Вначале кислота серная вызывает конденсацию формальдегида с кислотой хромотроповой, а затем окисляет образовавшийся продукт конденсации:

Для успешного протекания указанной выше реакции требу­ется кислота серная, концентрация которой должна быть не ниже 72 %.

Выполнение реакции. В пробирку вносят 3—5 капель иссле­дуемого раствора или дистиллята, 4 мл 6 М раствора кислоты серной и несколько кристалликов кислоты хромотроповой, а за­тем пробирку нагревают в течение 10 мин на водяной бане до 60°С. При наличии формальдегида в пробе появляется фиолето­вая окраска.

Второй вариант реакции. В пробирку вносят 1 мл исследуе­мого раствора, 0.2 мл 1% раствора кислоты хромотроповой в кислоте серной концентрированной, а затем прибавляют 5 мл кислоты серной концентрированной и взбалтывают. Появление фиолетовой или красно-фиолетовой окраски указывает на нали­чие формальдегида в исследуемом растворе.

Предел обнаружения: 1 мкг формальдегида в пробе.

Не дают этой реакции альдегиды уксусной, пропионовой и масляной кислот, хлоралгидрат и др. Эту реакцию дают ве­щества, которые при гидролизе, дегидратации или окислении образуют формальдегид.

Реакция с кислотой фуксинсернистой. Кислота фуксинсернистая (реактив Шиффа) с формальдегидом дает синюю или сине-фиолетовую окраску.

Для приготовления кислоты фуксинсернистой берут раствор парафуксина (I), имеющий красную окраску, прибавляют вод­ный раствор серы (IV) оксида или пропускают газообразный газ сернистый. При этом образуется кислота фуксинсернистая (II), не имеющая окраски. Эта кислота с альдегидами образует хиноидный краситель (III) розового цвета:

Выполнение реакции. В пробирку вносят 1 мл исследуемого раствора и 2—3 капли кислоты серной концентрированной. Со­держимое пробирки взбалтывают и охлаждают проточной водой, затем прибавляют 1 мл раствора кислоты фуксинсернистой. По­явление сине-фиолетовой или красно-фиолетовой окраски указы­вает на наличие формальдегида.

Раствор иногда окрашивается не сразу, а через 10—15 мин. Окраска может появляться не только под влиянием формальде­гида, но и под влиянием окислителей (хлор, азота оксиды, кислород воздуха и др.). Поэтому появление окраски через 30 мин после прибавления реактивов не должно рассматриваться как положительный результат реакции на формальдегид.

Эта реакция неспецифична для обнаружения формальдегида. Ее дают ацетальдегид, нитробензальдегид и др. Не дает указан­ной окраски хлоралгидрат. В сильнокислой среде (рН 0.7) с кислотой фуксинсернистой реагирует только формальдегид. При рН 2.7 с кислотой фуксинсернистой реагирует ацетальде­гид, фурфурол и др.

Приготовление реактива (см. Приложение 1, реактив 56).

Реакция с метиловым фиолетовым. Метиловый фиолетовый, который аналогично фуксину предварительно обесцвечен натрия сульфи­том, с формальдегидом дает сине-фиолетовую окраску.

Выполнение реакции. В пробирку вносят 1 мл исследуемого раствора и 0.5 мл 10 % раствора кислоты серной, а затем при­бавляют такой же объем раствора метилового фиолетового, обесцвеченного сульфитом или натрия гидросульфитом. При наличии формальдегида в пробе появляется сине-фиолетовая окраска. Эта реакция неспецифична для обнаружения формаль­дегида. Ее дают и некоторые другие альдегиды.

Приготовление реактива (см. Приложение 1, реактив 21).